人源抗狂犬病毒Fab抗体及其与纳米粒子交联的方法和应用

摘要

人源抗狂犬病毒Fab抗体及其与纳米粒子交联的方法和应用，所述抗体的VH链具有SEQID NO.1所示的氨基酸序列，并且所述抗体的VL链具有SEQ ID NO.3所示的氨基酸序列。本发明制备的抗狂犬病病毒的Fab抗体及其纳米化抗体Fab-CPNPs通过狂犬病病毒标准攻毒株CVS-24攻击昆明鼠，同时给予疫苗联合不同剂量的Fab抗体或纳米化Fab-CPNPs抗体对小鼠进行暴露后预防实验，结果表明：仅给予疫苗预防，不能提供足够的保护；不同剂量的Fab、Fab-CPNPs对狂犬病暴露后的小鼠具有一定的保护作用。制备的纳米化抗体在狂犬病暴露后治疗领域具有潜在的应用前景。

主权项

人源抗狂犬病毒Fab抗体与纳米粒子交联的方法，其特征在于制备步骤为：a.钙纳米粒子的制备：12.5mmol/L CaCl2、12.5mmol/L NaH2PO4和15.6mmol/L枸橼酸钠等体积混合，室温磁力搅拌20‑48h；超声仪内超声处理1‑3h；在4℃条件下10,000rpm离心15min；超声沉淀用PBS悬浮得钙纳米粒子悬浮液；b.纳米交联：纯化的Fab抗体加入上述悬浮液，所述抗体的VH链为SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列，并且所述抗体的VL链为SEQ ID NO.3所示的氨基酸序列，所述抗体在悬浮液中的浓度为45mg/L；4℃条件下，磁力搅拌5‑10h；在4℃条件下10,000rpm离心15min；离心沉淀用双蒸水悬浮即为所交联的人源抗狂犬病毒Fab抗体钙纳米粒子。