一种金属螯合纳米磁珠,其制备方法及应用

摘要

本发明公开了一种金属螯合纳米磁珠，还公开了其制备方法和应用。本发明采用金属盐和表面包被羟基的纳米磁珠为主要原料，使磁珠表面络合金属离子，获得金属螯合纳米磁珠，然后用于从体液中提取蛋白质和多肽并利用磁场进行分离，提取的蛋白质多肽可直接用于基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱和电喷雾串联质谱进行分析。该表面螯合金属离子的纳米磁珠具有十分优异的性能，可大量的从体液中提取蛋白质多肽，分离过程简单，可直接用于质谱分析。

主权项

一种金属螯合纳米磁珠，其特征在于在表面功能基团为羟基的纳米Fe3O4磁珠表面螯合有金属离子，其中金属离子为铜离子、镍离子、铁离子或锌离子，金属离子含量为1×108‑9×108ppb，该金属螯合纳米磁珠的直径为10‑200nm，通过以下方法进行制备：(1)超顺磁性表面包被羟基的纳米Fe3O4磁珠的制备：溶解FeCl3于强极性有机溶剂中，并在搅拌条件下加入聚乙二醇PEG‑1500，充分混匀后在氮气保护下加热回流，然后用弱极性有机溶剂沉淀Fe3O4的纳米磁珠，一步反应得到表面包被羟基的纳米Fe3O4磁珠；(2)表面螯合金属的纳米磁珠的制备：①在上述的纳米Fe3O4磁珠中加入无机碱液活化，活化后离心分离磁珠，其中无机碱为氨水、氢氧化钠、碳酸钠或氢氧化钾，碱的加入量使溶液的PH值达到10‑14，反应温度为20‑80℃；②加入无机碱、二甲基亚砜和环氧氯丙烷，继续活化磁珠使连接上环氧基团，反应完成后离心分离纳米磁珠；③加入络合剂亚氨基二乙酸(IDA)并在PH值为8‑10的弱碱条件下进行反应，使磁珠表面连接上络合试剂，反应完成后离心分离纳米磁珠；④将纳米磁珠于金属盐溶液中反应，使其表面络合金属离子，得到纳米金属螯合磁珠，其中金属离子为铜离子、镍离子、铁离子或锌离子，金属盐为硫酸铜、硫酸镍、硫酸铁或硫酸锌，金属盐浓度为0.01‑1mol/L。