一种离子对色谱法测定吡咯并喹呤醌含量的分析方法

摘要

一种离子对色谱法测定吡咯并喹呤醌含量的分析方法，属于色谱分析技术领域。本发明采用离子对高效液相色谱法对合成或发酵生产的PQQ进行定量分析，所得回归方程为y=4E+06x+627846，R2=0.9995，在2～12μg/mL试验范围内呈线性，最小检出量为2.0ng（S/N≥3）。本发明方法简单，制备过程中有可能产生的杂质得到了有效的分离。

主权项

一种离子对色谱法测定吡咯并喹呤醌PQQ含量的分析方法，其特征在于：仪器：WATERS 600型高效液相色谱仪，WATERS 2487紫外检测器，色谱柱Amethyst C18‑P  5μm，4.6×250mm；流动相：30%‑35%乙腈+70%‑65%缓冲液，所述缓冲液为pH2.8、含10mM的四丁基溴化铵TABA的20mM磷酸二氢钾溶液；使用前经0.45μm有机滤膜抽滤并脱气，流速：1.0mL/min；样品进样体积：5μL；柱温：室温；检测波长：256nm；精密称取干燥恒重的PQQ对照品，用二甲亚砜DMSO溶解配制成含PQQ 1.0mg/mL的溶液，记为W对照，作为对照溶液；精密称取被测样品，用DMSO配制成浓度为1.0mg/mL的溶液，记为W样品，作为供试品溶液；测定所得峰面积分别为S对照、S样品，按外标法计算被测样品中PQQ的含量为：（S样品/S对照）×（W对照/W样品）×100%，最小检出量为2.0ng，S/N≥3。