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一种涉及到鱼类DNA制备的一种快速提取鱼类DNA进行聚合酶链式反应的方法，其特征是：(1)将0.05‑0.15g酒精保存的鱼鳍条放入1.5ml离心管中，加入200‑400微升0.3‑0.6mol/L氢氧化钠溶液、2‑4微升β‑巯基乙醇、1‑4微克聚乙烯吡咯烷酮，然后将离心管在65‑85℃水中水浴10‑15分钟；(2)再加入200‑400微升0.3‑0.6mol/LTris‑HCl，摇晃2分钟，然后在高速离心泵上离心10‑15分钟；(3)将离心后的离心管中的上清液取200微升，转至新的离心管中，用以进行PCR扩增；(4)若要长期保存鱼类DNA，可将上述装有200微升上清液的离心管中加入200微升95％酒精、10‑24微克的醋酸钠，摇晃离心管让其混匀，然后在‑20℃环境中放置20分钟；(5)将在‑20℃环境中放置20分钟后的离心管，在高速离心泵离心15分钟，将离心管倒置于滤纸上去掉上清液；(6)再将去掉上清液的离心管中加入80％酒精300‑600微升，放置5‑10分钟后，高速离心泵离心5分钟，将离心管倒置于滤纸上去掉上清液；(7)将去掉上清液的离心管在40‑50℃下放置5‑10分钟以干燥DNA；(8)再将离心管中加入10‑50微升Tris‑EDTA，以溶解干燥的DNA，‑20℃环境冷冻保存。 |
