一种纵切幼苗叶基座转化小麦的方法

摘要

本发明提供了一种农杆菌介导的纵切幼苗叶基座转化小麦的转基因方法，包括（a）浸泡小麦种子使之吸水饱和，培养胚轴至长1～2cm；（b）将含有目的基因的农杆菌用含有细胞分裂素KT、植物生长素2,4-D、抗氧化剂DTT和L-Cysteine渗透培养基悬浮；（c）幼苗浸泡在渗透培养基中，用11号手术刀在小麦的叶基座中间部位纵切致伤；（d）致伤处理后的小麦幼苗浸没在渗透培养基中培养；（e）处理好的小麦幼苗在吸水纸上空干，栽入大棚中培养。该方法是一种无需经过组织培养阶段的农杆菌介导的小麦转化方法，具有比较高的实际应用价值和推广前景。

主权项

一种农杆菌介导的纵切幼苗叶基座转化小麦的转基因方法，包括以下步骤：（a）浸泡小麦种子使之吸水饱和，培养胚轴至长1～2cm;（b）将含有目的基因的农杆菌用渗透培养基悬浮，所述渗透培养基含有细胞分裂素0.1‑4mg/L的KT、0.5‑5mg/L的植物生长素2,4‑D、0.5‑5mM/L的抗氧化剂DTT和100～400mg/L的L‑Cysteine;（c）幼苗浸泡在渗透培养基中，用11号手术刀在小麦的叶基座中间部位纵切致伤;（d）致伤处理后的小麦幼苗浸没在渗透培养基中，28℃、24小时黑暗条件下140～170rpm培养15～30min;（e）处理好的小麦幼苗在吸水纸上空干，种入蛭石营养土混合土中25～28℃黑暗条件下培养2天，然后栽入大棚中培养。