一种纯化包涵体蛋白并复性的方法

摘要

本发明属于生物技术领域，提供了一种纯化包涵体蛋白的方法，该方法为将溶解的包涵体蛋白在离子交换层析柱中进行变性剂浓度的梯度洗脱货pH值的梯度洗脱或同时进行变性剂的浓度梯度洗脱及pH值的梯度洗脱。本发明在离子交换层析复性的基础上，提供了能使变性蛋白或者包涵体蛋白快速、简便的纯化的工艺，在蛋白纯化的同时，也可以达到了蛋白复性的目的；与其他的复性方法相比，两种流动相的设置，大大简化了操作步骤，提高了蛋白在高浓度下的复性的效率。

主权项

一种纯化包涵体蛋白的方法，其特征在于，该方法为将溶解的包涵体蛋白在离子交换层析柱中进行变性剂浓度的梯度洗脱或pH值的梯度洗脱或同时进行变性剂的浓度梯度洗脱及pH值的梯度洗脱；其具体步骤是：1)酸性/碱性流动相I或者其它溶液溶解的包涵体蛋白进经流动相I平衡后的离子交换层析柱，包涵体蛋白可逆地被吸附在层析介质上；2)然后用酸性/碱性流动相II梯度取代酸性/碱性流动相I对包涵体蛋白溶液进行梯度洗脱，洗脱梯度长度为1‑5个的柱体积，流动相II中的变性剂的浓度低于流动相I中变性剂的浓度；所述的变性剂为脲、Triton或Tween；在流动相I中的浓度为6～10mol/L；在流动相II中的浓度为0.5～3mol/L；所述的流动相I为酸性缓冲液，pH为3～7；流动相II为碱性缓冲液，pH为8～11。