高致病性猪繁殖与呼吸综合征活疫苗（JXA1-R株）实时荧光RT-PCR检测方法和试剂盒

摘要

本发明公开了用于高致病性猪繁殖与呼吸综合征活疫苗(JXA1-R株)实时荧光RT-PCR检测的核苷酸引物、探针序列及方法，以及该方法在检测高致病性猪繁殖与呼吸综合征活疫苗(JXA1-R株)中的应用。本发明的方法克服了传统检测技术中存在的不足，具有快速简便、特异性强、敏感性高、可靠性好的特点，适于高致病性猪繁殖与呼吸综合征活疫苗(JXA1-R株)的快速检测及疫苗生产的质量监控。

主权项

一种能够检测高致病性猪繁殖与呼吸综合征活疫苗JXA1‑R株的实时荧光RT‑PCR方法，其特征包括：(1)针对PRRSV Nsp2基因设计能够检测高致病性猪繁殖与呼吸综合征活疫苗JXA1‑R株的特异性引物和探针序列；(2)采用FAM、VIC、HEX、JOE、NED、TAMRA、CY3、ROX或CY5任意一种荧光素标记高致病性猪繁殖与呼吸综合征活疫苗JXA1‑R株的探针序列；(3)将用于检测高致病性猪繁殖与呼吸综合征活疫苗JXA1‑R株的引物和探针置于同一个反应管中，使用荧光PCR扩增仪进行实时荧光RT‑PCR反应，其中，所述的特异性引物为：由序列为TCCACGCATCCTCGGG的上游引物LV‑HP‑PRRSV‑F3和序列为TGCTCTCGTCAGACTCCCGT的下游引物LV‑HP‑PRRSV‑R2组成的引物对；所述的探针序列为：CCTCGGCTCCCTCCA。