发明名称 一种魔芋指纹图谱的建立方法
摘要 本发明涉及一种魔芋指纹图谱的建立方法。一种魔芋指纹图谱的建立方法,采用高效液相色谱法包括如下步骤:(a)试样的制备:取魔芋组织于杀青烘干,研碎,称取于试管中,用纯净水定容,过滤,按照植物氨基酸的分析方法,对试样进行柱前衍生;(b)色谱条件:用高效液相色谱仪或氨基酸分析仪,色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填料;(c)测定:精密吸取供试品溶液注入高效液相色谱仪,按照高效液相色谱法测定,得到指纹图谱。本发明可以根据通过分析指纹图谱中特征峰与魔芋品种、品质、抗性、产量、生长状况等的关系,为魔芋资源收集整理、分类、新品种选育、研究新型氨基酸农药防治魔芋病害等科研工作提供技术指导。
申请公布号 CN101251518B 申请公布日期 2012.05.30
申请号 CN200810046880.0 申请日期 2008.01.31
申请人 恩施土家族苗族自治州农业科学院 发明人 陈永波;滕建勋;降巧龙;牟方贵;杨朝柱
分类号 G01N30/02(2006.01)I;G01N30/06(2006.01)I 主分类号 G01N30/02(2006.01)I
代理机构 代理人
主权项 一种魔芋指纹图谱的建立方法,其特征在于采用高效液相色谱法,具体包括如下步骤:(a)试样的制备:取魔芋组织于115℃杀青10min,80℃烘干,研碎,称取0.5000g于试管中,加纯净水10mL,于80℃干燥箱中保温12小时,取出,用纯净水定容至10mL,滤纸过滤后,溶液用0.45μm滤膜过滤,按照植物氨基酸的分析方法,对试样进行柱前衍生;(b)色谱条件:用高效液相色谱仪,色谱柱为美国Waters公司提供的C18柱:流动相A为pH=4.95的140mM乙酸钠‑三乙胺缓冲液,流动相B:100%乙腈,流动相C:100%超纯水;柱温37℃,流速1.0‑1.2mL/min;检测波长:248nm;色谱柱以十八烷基硅烷键合硅胶为填料;梯度程序:0min:100%A;0.5min,97%A+3%B;15min,96%A+4%B;33min,60%B+40%H2O;35min,100%A;运行时间:40min;(c)测定:精密吸取供试品溶液8μl注入高效液相色谱仪,按照高效液相色谱法测定,得到指纹图谱。
地址 445000 湖北省恩施市学院路126号