一种鉴别辣椒抗疫病性状的分子标记方法

摘要

本发明公开了一种鉴别辣椒抗疫病性状的分子标记方法，包括辣椒基因组DNA的提取、PCR扩增及特异酶切产物多态性分析，其特征在于根据植物抗病基因序列人工合成一对由一定数量的碱基组成特定序列的核苷酸分子，以此对核苷酸分子为引物，通过PCR反应得到分子标记，利用此标记中的特异酶切产物的大小能鉴别出辣椒抗疫病材料和感疫病材料。这一方法用于辣椒苗期或成株期抗疫病性筛选，能极大地加速辣椒抗疫病育种进程。

主权项

一种鉴别辣椒抗疫病性状的分子标记方法，其特征在于，按以下步骤进行：1)人工设计合成一对核苷酸序列作为引物，该引物是由碱基组成的特定序列的寡聚体，其中：正向引物：5’‑AGGTGGTCTTCAATGATCAGAGA‑3’反向引物：5’‑CCTGAGGCAAATTCCAAATCTC‑3’2)提取辣椒基因组的DNA，以引物对辣椒基因组DNA进行PCR扩增，抗疫病材料和感疫病材料均可扩增出长度为590bp的片段；3)PCR扩增产物在37℃条件下经Bcg I酶切16h后，Bcg I酶的酶切位点为：抗疫病品种克隆的基因序列第324bp处；酶切产物经2％琼脂糖凝胶上电泳、溴化乙锭染色，用凝胶成像系统观察并拍照记录，抗疫病植株酶切产物有325bp和265bp两条谱带，感疫病植株只有590bp一条谱带。