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一种取代度为1.26的硫酸化党参多糖在制备抗鸡新城疫病毒的药物中的应用，其特征在于所述的硫酸化党参多糖是采用包括下述步骤的方法制备的：1)提取党参多糖：用水煎‑超声醇沉法：取党参饮片500g，粉碎，置于索式提取器中，用80％乙醇回流3次，至回流液接近无色，药渣加入20倍水中，80℃超声，功率80W，每次10min，预处理2次，再煎煮3次，第一次2h，第二次1h，第三次0.5h，合并三次滤液，浓缩至650mL，加95％乙醇使醇浓度达到80％，静置过夜，离心取沉淀，再用乙醇、丙酮洗涤，干燥，得到粗党参多糖；2)纯化党参多糖：2.1)去蛋白：将粗党参多糖配成5％的水溶液，首先用反复冻融法，‑20℃冷冻、室温下缓慢融化，5000rpm离心，除去部分蛋白，然后加入溶液体积1/5的三氯甲烷，随之加入三氯甲烷体积1/5的正丁醇，剧烈震荡20min，5000rpm离心20min，分去水层与有机层交界处的变性蛋白，反复处理6次；2.2)去色素：将去蛋白的多糖溶液加入1％活性炭，旋转蒸发仪处理10min，抽滤去除沉淀；2.3)柱层析：湿法装Sephadex G‑75层析柱，用0.9％NaCl冲洗，平衡，过夜，取去色素的多糖溶液上样，开启恒流泵，用0.9％NaCl洗脱，流速控制在30mL/h，收集洗脱液，10mL/管，每隔4管用苯酚‑硫酸法测定糖含量，绘制多糖洗脱曲线，合并含糖管洗脱液，适当浓缩，加入95％乙醇沉淀，干燥，得纯化的党参多糖；3)党参多糖的硫酸化修饰3.1)酯化试剂制备：将带有搅拌和冷凝装置的三颈烧瓶置冰盐水浴中，加入50mL无水吡啶，快速搅拌，充分冷却后，按氯磺酸‑吡啶体积比1∶8逐滴加入氯磺酸，于40min内加完，反应结束后，撤去冰盐水浴；3.2)修饰操作：精密称取纯化的党参多糖400mg加入装有酯化试剂的三颈烧瓶中，反应温度为80℃，反应时间为1h，搅拌反应；反应结束后冷却至室温，反应液加入预冷的100mL冰水中，用5mol/L的NaOH溶液中和至pH 7，加入3倍体积的无水乙醇，静置24h，取沉淀用自来水透析2d、蒸馏水透析1d，透析液冷冻干燥得硫酸化党参多糖；产物量达728mg；取代度达1.26。 |
