五唇兰的无菌播种和组织培养方法

摘要

本发明涉及一种五唇兰的无菌播种和组织培养方法，其特征在于选用海南产的原生种为材料，开花时，选择健康母株进行人工授粉，授粉后100-120天将果实取下，用70％-80％酒精浸泡25-35秒后置于0.05％-0.15％的升汞溶液中消毒15-25分钟，无菌水冲洗4～5次后切开果实，用接种针将白色粉末状的种子接种到种子萌发培养基上培养25-30天直到出现原球茎和芽，培养温度为25-28℃，利用原球茎和芽的混合组织在继代培养基上增殖25-35天，增殖温度为25-28℃，使原球茎和芽增加4-6倍，这类组织在壮苗培养基上培养25-35天后形成小苗，把小苗再转到新鲜壮苗培养基上培养，培养25-35天后瓶苗长至3-5厘米高时，把瓶苗移到自然光下炼苗10-20天，光照度为1500～2000LX，而后从瓶中取出，洗净根部的培养基，移入水苔基质或火山石中栽培。其优点为，五唇兰种子萌发率高，试管苗培育时间短、生长健壮，具有可操作性强，应用价值高。

主权项

一种五唇兰的无菌播种和组织培养方法，其特征在于选用海南产的原生种为材料，开花时，选择健康母株进行人工授粉，授粉后100‑120天将果实取下，用70％‑80％酒精浸泡25‑35秒后置于0.05％‑0.15％的升汞溶液中消毒15‑25分钟，无菌水冲洗4～5次后切开果实，用接种针将白色粉末状的种子接种到种子萌发培养基上培养25‑30天直到出现原球茎和芽，培养温度为25‑28℃，利用原球茎和芽的混合组织在继代培养基上增殖25‑35天，增殖温度为25‑28℃，使原球茎和芽增加4‑6倍，这类组织在壮苗培养基上培养25‑35天后形成小苗，把小苗再转到新鲜壮苗培养基上培养，培养25‑35天后瓶苗长至3‑5厘米高时，把瓶苗移到自然光下炼苗10‑20天，光照度为1500～2000LX，而后从瓶中取出，洗净根部的培养基，移入水苔基质或火山石中栽培；所述的种子萌发培养基包括VW培养基，并在每1升VW培养基中含有6‑苄基嘌呤0.2毫克/升、萘乙酸0.2毫克/升及10％的椰子汁；所述的继代培养基包括VW培养基，并在每1升VW培养基中含有6‑苄基嘌呤0.2毫克/升及萘乙酸0.5毫克/升；所述的壮苗培养基包括VW培养基，并在每1升VW培养基中含有6‑苄基嘌呤0.2毫克/升、萘乙酸0.5毫克/升及马铃薯提取液100毫升/升。