一种罗丹明B的免疫亲合层析柱及其制备方法和用途

摘要

本发明提供了一种直接检测罗丹明B免疫亲合层析柱。本发明所提供的免疫亲合层析柱用来提取和检测食品中的违禁添加剂罗丹明B，包括罗丹明B的特异性抗体、偶联有罗丹明B特异性抗体Sepharose4B、装载亲和材料的塑料柱、氧化铝柱，上样缓冲液、淋洗液及洗脱液。本发明的罗丹明B免疫亲合层析柱使用方便，具有高特异性、高灵敏性，可快速检测食品中残留的罗丹明B。

主权项

一种制备罗丹明B免疫亲合层析柱的方法，该方法包括下列步骤：a)将罗丹明B特异性抗体与溴化氰活化的Sepherose4B胶混合，用转鼓搅拌，偶联过夜；烧结玻璃滤器抽滤偶联胶，PBS洗脱未结合抗体，每次5毫升，洗4次；用1M乙醇胺封闭未结合位点，加过量乙醇胺孵育2.5小时，抽滤乙醇胺，用偶联缓冲液抽洗，然后再用HAC，Tris‑Hcl缓冲液交替洗涤共4次，每次5ml；b)将偶联后的胶装入塑料柱中，装注1ml/柱，稍用力压紧，即得所述的罗丹明B免疫亲合层析柱。c)将所制备的罗丹明B免疫亲合层析柱与氧化铝柱串联，及得直接检测罗丹明B的免疫亲合层析柱。