一种依诺肝素钠的制备方法

摘要

本发明公开了一种依诺肝素钠的制备方法，其步骤包括盐化、干燥、酯化、醇沉、氧化、醇沉、精滤、冻干制得成品。本发明采用亲水液相反应和疏水液相反应以及固相反应，将大分子肝素钠降解为具有特定结构的低分子肝素钠，并控制产物分子量和分子量分布范围，使导致出血危险的抗FIIa活性大幅降低，抗FXa活性相对提高，产品有效性和安全性优势明显，可有效预防静脉血栓栓塞症和肺栓塞症，可用于矫形外科、神经外科术前和术后血栓形成，可大大降低患中风风险，能更有效减少不稳定性冠状动脉综合症患者的死亡、心力衰竭、复发性心绞痛等，并可降低高甘油三脂血症，能有效解决普通未分级肝素及其衍生物长期使用后的出血、骨质疏松、诱导血小板减少等副作用。

主权项

一种依诺肝素钠的制备方法，其特征包括以下步骤：a.按2000～4000、4800～10800重量份分别称取肝素钠和苄索氯铵后，在20000～40000重量份的30～40℃的纯化水中加入所称取的肝素钠，搅拌使之完全溶解；在28800～64800重量份的45～50℃的纯化水中加入所称取的苄索氯铵搅拌使之完全溶解；b.盐化：在搅拌状态下将上述溶解的肝素钠溶液缓慢加入已溶解的苄索氯铵溶液中后，再继续搅拌30～60分钟后静置；c.干燥：将上述静置液离心分离后得到的肝素盐化物结晶加入纯化水洗涤后，在50～60℃条件下干燥；d.酯化：当上述肝素盐化物结晶含水量低于10％时，在30～35℃水浴温度下，将干燥的肝素盐化物结晶加入30000～40000重量份的N，N‑二甲基甲酰胺中，当肝素盐化物结晶完全溶解后加入1000～4000重量份氯化苄，然后搅拌保温酯化20～30小时；e.醇沉：上述酯化结束后，在搅拌状态下加入108000～144000重量份的2％乙酸钠乙醇溶液，继续搅拌15～30分钟后离心分离收集沉淀物，然后在搅拌状态下于沉淀物中加入54000～72000重量份的2％乙酸钠乙醇溶液，继续搅拌15～30分钟后，离心分离收集沉淀物，在沉淀物中加入2500～5000重量份的10％氯化钠溶液搅拌使之完全溶解，然后在搅拌状态下再加入10000～20000重量份的90～95％乙醇生成沉淀；f.氧化：分离上清液后，将上述沉淀加入36000～72000重量份的纯化水溶解，在50～60℃水浴保温下，缓慢加入5～10M的氢氧化钠溶液，然后保温反应45～90分钟后迅速降温至25～40℃；g.调节上述反应液pH值至6.0～7.0后过滤，然后加入360～720重量份的 乙酸钠搅拌溶解，在搅拌状态下加入144000～288000重量份的90～95％乙醇；h.持续搅拌15～30分钟后静置8～10小时，分离出上清液后加入18000～36000重量份的纯化水搅拌使沉淀物完全溶解，然后在pH10.0～11.0、20～30℃条件下加入60～120重量份的双氧水；i.醇沉：上述氧化反应6～8小时后，调整反应液pH6.5～7.0后过滤，然后加入120～240重量份的氯化钠搅拌溶解，再加入60000～120000重量份的90～95％乙醇搅拌沉淀物，持续搅拌15～30分钟后静置8～10小时；j.精滤：加入10～15重量倍的纯化水将上述沉淀物搅拌溶解后过滤，然后将滤液用1000D超滤膜超滤浓缩；k.冻干：将上述浓缩液用0.1μm滤膜除菌过滤后，滤液入冻干机冷冻干燥，制得依诺肝素钠成品。