一种同时检测苹果中五种多酚并进行品种识别的HPLC方法

摘要

本发明公开了一种同时检测苹果中五种多酚并进行品种识别的HPLC方法。它首先将苹果去核，加入抗坏血酸，粉碎后采用超声、氮气保护或加热方法防止褐变，然后加入甲醇-水溶液或乙酸乙酯超声提取，收集上清液后重复提取一次，合并上清液，进行HPLC检测。根据不同品种不同地区所测五种多酚含量分析，采用绿原酸和芦丁作为目标化合物对七个不同苹果品种进行识别。本发明采用HPLC同时快速分离测定五种多酚，并达到对不同品种的苹果识别的目的，此方法样品前处理简单，成本低，可同时测定，实现了对不同品种苹果的识别。

主权项

一种同时检测苹果中五种多酚的HPLC方法，其特征是，包括以下步骤：(1)苹果的前处理将苹果去核，加入足量的抗坏血酸水溶液，用榨汁机粉碎后采用超声、氮气保护或加热方法防止褐变；(2)多酚物质的提取采用甲醇‑水溶液或乙酸乙酯提取，所述甲醇‑水溶液提取为：称取粉碎好的苹果样品，加入甲醇‑水溶液，涡旋震荡后超声；离心，将上清液过滤至烧瓶，然后重复萃取一次，合并上清液；取上清液过0.45μm的滤膜，然后用HPLC检测；所述乙酸乙酯提取为：称取粉碎好的苹果样品，加入乙酸乙酯，涡旋震荡后超声；离心，将上清液过滤至烧瓶，然后重复萃取一次，合并上清液；旋转蒸干后用乙腈定容，然后用HPLC检测；(3)五种多酚的同时检测HPLC‑DAD检测：色谱柱：Atlantis C18，规格为：5μm，250mm×4.5mm，选择柱温，选择流动相梯度洗脱，选择测定波长后检测；(4)多酚含量测定方法的建立用甲醇‑水溶液逐级稀释五种多酚标准品，配制成一组混合工作标准溶液，以每个浓度下的标准溶液所得的相对响应值为纵坐标，标准溶液的浓度为横坐标，分别建立标准校正曲线，在检测样品时，根据样品所得的相对响应值，然后分别从标准曲线中读出样品中各种多酚含量。