粮食及其加工副产物中脂肪酶活力的快速测定方法

摘要

本发明涉及一种稻米、小麦及其加工副产物中脂肪酶活力的快速检测方法，涉及粮食精深加工领域。首先将米糠等待测样品进行部分脱脂，并根据其原始水分含量大小加入适量蒸馏水、调节至一定水分活度，然后往其中加入适量橄榄油，培养一段时间，最后由铜皂比色法测定其增加的游离脂肪酸量，换算得到米糠脂肪酶活力。该方法省去了脂肪酶的提取及纯化步骤，操作简便，结果准确，可广泛应用于粮食加工企业、仓储企业及粮油检测机构的粮油品质检验与控制。

主权项

1.粮食及其加工副产物中脂肪酶活力的快速测定方法，其特征在于按照下述步骤进行：（1）待测粮食及其加工副产物样品经粉碎后，过30目筛，取筛下物，加入5～10倍体积的有机溶剂置于气浴摇床中，以100～250rpm振荡脱脂20～120min；（2）倾斜倒出脱脂的溶酶后，将样品置于烘箱中，20～60℃热风烘干0.5～3h去除残余溶酶，取出放入干燥器中；（3）称取步骤（2）干燥后的样品适量，分别置于两试管中，一只空白A_i，另一只为A_f，往每只试管中分别加入0～2.5倍质量的蒸馏水或30℃以下低温烘干0.5～6h，调节其水分活度为0.6～0.9；再加入0.2～2.5倍质量的橄榄油，将三者充分搅拌均匀；（4）取步骤（3）空白管A_i中的试样，立即加入1~10倍体积的有机溶剂，涡旋振荡30秒，然后5000rpm离心3min，上清液倒入圆底烧瓶中，反复提取2～3次；（5）取步骤（3）样品管A_f中的试样，25～75℃下，培养1～8h后，取出，加入1～10倍体积的有机溶剂，振荡30秒，然后5000rpm转速下离心3min，上清液倒入圆底烧瓶中，反复提取2～3次；（6）将步骤（4）、（5）得到的提取液在40℃以下减压蒸发，除去有机溶剂；剩余固形物溶于0.5～3倍样品质量的异辛烷后，加入1～2倍异辛烷体积的5%醋酸铜溶液振荡1min，4000rpm离心2~10min，获得有机相与水相，其中所述的5%醋酸铜溶液使用前用吡啶调节其至pH5.5～6.5；（7）经过步骤（6）获得的有机相，在715nm下测其吸光度值，试样吸光值与油酸异辛烷标准溶液的吸光值做比较；（8）将步骤（7）中得到的吸光度值，代入下式计算脂肪酶活力：其中LA=脂肪酶活动度（U/g）；1000为从mol/L到μmol/mL的转换系数；4为用于重溶油脂的异辛烷的体积（mL）；v为加入橄榄油的体积（mL）；A_f为在715nm下经过培养的样品的吸光度；A_i为在715nm下空白样品的吸光度；ε为油酸在715nm下的摩尔吸光系数（M¹·cm¹）；t为培养时间（h）；l为路径长度（cm）；s为样品干重（g）。