SmDXS和SmGGPPS双基因共转化提高丹参酮含量的方法

摘要

本发明涉及生物技术领域，是一种提高丹参酮含量的方法，用丹参1-脱氧木酮糖-5-磷酸合成酶(SmDXS)和丹参牻牛儿基牻牛儿基焦磷酸合成酶(SmGGPPS)基因构建成SmDXS和SmGGPPS基因的植物双价高效表达载体，遗传转化丹参叶片获得转SmDXS和SmGGPPS基因的丹参毛状根。本发明获得的转基因丹参毛状根中丹参酮含量显著提高，其中一个株系的总丹参酮含量为对照的6.29倍。本发明提供了一种提高丹参毛状根中丹参酮含量的方法，也为生产具重要临床需求的丹参酮提供了一种新型优质原料。

主权项

SmDXS和SmGGPPS双基因共转化提高丹参酮含量的方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)将1‑脱氧木酮糖‑5‑磷酸合成酶基因SmDXS和牻牛儿基牻牛儿基焦磷酸合成酶基因SmGGPPS插入植物表达载体，构建重组载体；所述的1‑脱氧木酮糖‑5‑磷酸合成酶基因和牻牛儿基牻牛儿基焦磷酸合成酶基因序列分别为SEQ ID：1和SEQ ID：2的DNA序列；(2)将步骤(1)所获得的重组载体转入发根农杆菌，构建含有重组载体的发根农杆菌；(3)用步骤(2)所得含有重组载体的发根农杆菌介导1‑脱氧木酮糖‑5‑磷酸合成酶基因和牻牛儿基牻牛儿基焦磷酸合成酶基因转化丹参，获取毛状根；(4)检测步骤(3)毛状根中的1‑脱氧木酮糖‑5‑磷酸合成酶基因和牻牛儿基牻牛儿基焦磷酸合成酶基因，取筛选结果为阳性的转基因毛状根。