螠蛏共附生菌株抑菌活性蛋白的制备方法

摘要

本发明公开一种操作简单、成本低廉的螠蛏共附生菌株抑菌活性蛋白的制备方法，依次按如下步骤进行：取干净、新鲜的螠蛏肉研磨后，将200mL研磨液均匀涂布于牛肉膏蛋白胨平板培养基上，37℃恒温培养2天；挑取单菌落反复划线培养至纯菌株，用滤纸片法检测纯菌株的抑菌活性；取抑菌圈直径大于或等于10mm的菌株，在用葡萄糖做碳源pH5的沙氏液体培养基中35℃培养120h；4000r/min离心去除菌体，在上清液中加入硫酸铵，硫酸铵的饱和终浓度为90%，4℃静置过夜，10000r/min离心30min，将沉淀用PBS缓冲液溶解后，再用分子截留量3500道尔顿的透析袋透析4天，取透析袋中物冷冻干燥。

主权项

一种螠蛏共附生菌株抑菌活性蛋白的制备方法，其特征在于依次按如下步骤进行：a. 取干净、新鲜的螠蛏肉研磨后，将200 mL研磨液均匀涂布于牛肉膏蛋白胨平板培养基上，37℃恒温培养2天；b. 挑取单菌落反复划线培养至纯菌株，用滤纸片法检测纯菌株的抑菌活性；     c. 取抑菌圈直径大于或等于10 mm的菌株，在用葡萄糖做碳源pH5的沙氏液体培养基中35℃培养120 h；d．4000r/min离心去除菌体，在上清液中加入硫酸铵，硫酸铵的饱和终浓度为90%，4℃静置过夜，10000 r/min离心30 min，将沉淀用PBS缓冲液溶解后，再用分子截留量3500道尔顿的透析袋透析4天，取透析袋中物冷冻干燥。