发明名称 |
酸性果胶酶液体制剂的生产方法 |
摘要 |
本发明公开了一种酸性果胶酶液体制剂的生产方法,以苹果渣为诱导物,以黑曲霉为菌种,经过发酵、浸提、固液分离、去渣澄清、乙醇沉淀、固液分离、复溶工序制得液体酸性果胶酶酶制剂,解决了现有技术液体酸性果胶酶在常温下保存酶活损失快、保质期短的问题。 |
申请公布号 |
CN101684462B |
申请公布日期 |
2011.05.11 |
申请号 |
CN200910160785.8 |
申请日期 |
2009.07.10 |
申请人 |
山东康地恩生物科技有限公司 |
发明人 |
刘鲁民;范志恒;陈亮珍;于瑞凤;杨晓英;陈刚;黄炳亮;彭虹旎;刘安邦;李红军 |
分类号 |
C12N9/96(2006.01)I;C12N9/26(2006.01)I;C12R1/685(2006.01)N |
主分类号 |
C12N9/96(2006.01)I |
代理机构 |
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代理人 |
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主权项 |
一种酸性果胶酶液体制剂的生产方法,其特征是按下述工艺步骤进行:1)、斜面菌种的制备:以黑曲霉(Aspergillus niger)为菌种,用麸皮、琼脂、苹果渣按重量比20∶2∶1的比例制成斜面培养基,121℃高压灭菌30min,冷却后划线接种于30℃恒温培养72h;2)、摇瓶菌种的制备:按麸皮100g、硫酸铵2g、葡萄糖1g、水200ml的配比配料,装入3L三角瓶中,121℃高压灭菌30min,冷却后接种,接种重量比为1%~5%,30℃恒温培养48h;3)、发酵制备熟曲:按麸皮100、苹果渣20、葵盘粉20、硫酸铵2、葡萄糖1和水300的重量配比称好原料,混合拌匀后,121℃灭菌1h,冷却后接种摇瓶菌种,接种重量比为3%,控制发酵室温度为28~32℃,湿度80~100%,发酵84~96h,即得熟曲;4)、浸提:以0.02mol的磷酸氢二钠溶液与0.01mol的柠檬酸溶液配制成pH为3.8的浸提液,熟曲与浸提液按1∶3的重量比混合拌匀,浸提30min;5)、固液分离:浸提后经压榨得混汁,在混汁中加入重量比为1%的氧化铝,再经板框过滤得清汁;6)、去渣澄清:清汁经超滤膜微滤;7)、乙醇沉淀:将微滤后的清汁,在搅拌的状态下按80%的重量比加入体积比为95%的乙醇,静置沉淀10h;8)、固液分离:将步骤7)的沉淀物压滤,除去乙醇,制得固态果胶酶;9)、复溶:将固态果胶酶加入溶剂中进行复溶,即得酸性果胶酶液体酶制剂;所述溶剂由甘油、山梨醇、聚乙二醇和山梨酸钾组成,与固态果胶酶的重量比分别为:20%、12%、0.5%和0.1%。 |
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