一种接枝改性蛋白质的制备方法及其应用

摘要

一种接枝改性蛋白质的制备方法及其应用，属于接枝改性技术领域。本发明介绍了一种蛋白质的接枝改性方法：先用引发剂、链转移剂和功能性单体制备一端带有活性官能团的聚合物链，然后再用催化剂将氨基封端的聚合物接枝到蛋白质上，反应结束后再通过沉淀、离心、乙醇抽提或醇洗、及干燥，将接枝后的改性蛋白分离出来。接枝改性蛋白质兼有蛋白质和氨基封端聚合物的优良性质，为其进一步的应用拓展了空间：与蛋白质相比，接枝了亲水性聚合物的接枝改性蛋白质具有优良的溶解性，表面疏水性，乳化性及起泡性等优良性能，因此可将其作为乳化剂来应用。

主权项

一种接枝改性蛋白质的制备方法，其特征在于工序为：用引发剂、链转移剂和功能性单体制备氨基封端的聚合物；用催化剂和助催化剂将氨基封端的聚合物接枝到蛋白质上；接枝反应24小时后再通过沉淀、离心、乙醇抽提或醇洗、及干燥，将接枝后的接枝改性蛋白质分离出来；(1)制备氨基封端的聚合物：将单体溶于去离子水中搅拌，并在氮气保护下加入链转移剂和引发剂，单体、链转移剂和引发剂的摩尔比为50∶2-10∶1，然后密封瓶口，转入60℃油浴反应8小时，反应结束后用丙酮沉淀，沉淀用去离子水溶解，再用丙酮沉淀，取杯底沉淀物在30℃烘箱中干燥至恒重，得氨基封端的聚合物备用；(2)制备接枝改性蛋白质：用pH≈8.5的硼酸缓冲溶液分别溶解氨基封端的聚合物、溶解蛋白质，溶解催化剂1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐EDC、及溶解辅助催化剂N-羟基琥珀酰亚胺NHS，搅拌使其充分溶解，氨基封端的聚合物、蛋白质、EDC、NHS的质量比为250∶250∶1∶3，将硼酸缓冲溶液溶解的上述四种溶液混合，在室温下反应24小时；(3)接枝改性蛋白质的后处理：用反应液10倍体积的丙酮对反应后溶液进行沉淀，离心8分钟取管底沉淀物，然后用无水乙醇对沉淀物抽提24小时以除去未接枝上的氨基封端聚合物或用反应液2倍体积的无水乙醇清洗3次以除去未接枝上的氨基封端聚合物，然后将所得接枝物在30℃烘箱中干燥至恒重或冷冻干燥，或者喷雾干燥，得到接枝改性蛋白质。