产生具有改良的解离速率的适配体的方法

摘要

本发明描述了产生能结合靶分子的适配体的改良的SELEX方法，以及产生能结合且共价交联靶分子的光反应性适配体的改良的光SELEX方法。特别地，本发明描述了产生与使用先前的SELEX和光SELEX方法获得的适配体相比具有更慢的解离速率常数的适配体和光适配体的方法。本发明进一步描述了与使用先前方法获得的适配体和光适配体相比具有更慢的解离速率常数的适配体和光适配体。此外，本发明描述了包含多种功能性的适配体构建体，其包括可裂解元件、检测元件以及捕获或固定元件。

主权项

鉴别适配体的方法，所述方法包括：(a)制备核酸候选混合物；(b)将所述候选混合物与靶分子接触，其中相对于候选混合物中其它核酸对靶分子具有增加的亲和性的核酸结合所述靶分子，形成核酸-靶分子复合物；(c)将所述核酸-靶分子复合物暴露于慢解离速率富集过程；(d)将所述核酸-靶分子复合物与候选混合物分开；(e)解离所述核酸-靶分子复合物以产生游离核酸；(f)扩增所述游离核酸以产生富含能以增加的亲和性结合靶分子的序列的核酸的混合物，从而可以鉴别靶分子的适配体；(g)如果需要重复步骤(b)至(f)；及(h)鉴别靶分子的至少一个适配体。