检测慢性粒细胞白血病的单链DNA适配子及其制备方法

摘要

本发明提供了一种检测慢性粒细胞白血病的单链DNA适配子及其制备方法，体外合成长度为88个碱基的随机单链DNA文库，采用生物素-链霉亲和素磁珠法制备次级文库，以正常人中性粒细胞为反筛细胞，利用SELEX技术筛选出与慢性粒细胞白血病K562细胞特异结合的适配子。将筛选得到的适配子回收纯化后连接pGEM-T质粒载体，经蓝白筛选后，随机挑选24个克隆子进行序列测定。采用荧光标记引物法检测亲和力，并用DNAMAN软件对适配子序列进行一级结构同源性分析和二级结构预测。一级结构分析发现无同源序列，但可分为6个家族(family)。二级结构分析表明：适配子形成的茎环、凸环结构可能是与K562细胞特异性结合的结构基础。24个克隆适配子中，第5、10、21、22、24号适配子与慢性粒细胞白血病K562细胞的结合率较高，分别为40.6％、45.2％、40.8％、42.2％、41.6％。

主权项

一种检测慢性粒细胞白血病的单链DNA适配子，其特征在于：该适配子具有序列表中SEQ ID No.1至SEQ ID No.5所述的核苷酸序列的任意一种。