摘要 |
1. Способ измерения ответа хелперных Т-клеток на тестируемое вещество, включающий следующие стадии: ! (а) выделение антиген-представляющих клеток (АПК) и Т-клеток из образца, полученного из организма; ! (б) истощение регуляторных Т-клеток из этих выделенных клеток; ! (в) инкубирование указанных АПК и полученных на стадии (б) клеток, истощенных по регуляторным Т-клеткам, с тестируемым веществом; и ! (г) анализ Т-клеточных ответов на тестируемое вещество. ! 2. Способ по п.1, дополнительно включающий: ! (а1) отделение антиген-представляющих клеток (АПК) от других клеток; и где стадия (в) включает инкубирование тестируемого вещества с отделенными АПК перед последующим добавлением клеток, истощенных по регуляторным Т-клеткам. ! 3. Способ по п.2, где АПК обрабатывают цитокинами перед добавлением тестируемого вещества. ! 4. Способ по п.1, где АПК и Т-клетки получают из мононуклеарных клеток периферической крови (МКПК). ! 5. Способ по п.1, где АПК и Т-клетки являются человеческими. ! 6. Способ по п.1, где регуляторные Т-клетки истощены по CD25hi+ Т-клеткам. ! 7. Способ по п.1, где Т-клетки истощены по CD8+ Т-клеткам. ! 8. Способ по п.1, где Т-клеточные ответы анализируют путем измерения любого одного или более из следующего: пролиферации Т-клеток, высвобождений цитокинов, изменений транскрипции в Т-клетках, и/или других маркеров, ассоциированных с активацией Т-клеток. ! 9. Способ по п.8, где пролиферацию Т-клеток измеряют по поглощению меченного тритием тимидина. ! 10. Способ по п.8, где высвобождение цитокина измеряют по высвобождению IL-2 и/или IFNγ. ! 11. Способ по п.1, где Т-клеточные ответы анализируют более чем в одной временной точке во время инкубации. ! 12. Спос� |