| 摘要 |
1. Тест-система для генотипирования вируса гепатита С, представляющая собой процедуру идентификации генотипа и подтипа ВГС, включающую следующие стадии: ! (а) обратную транскрипцию, совмещенную с ПЦР (ОТ-ПЦР), с использованием вирусной РНК в качестве матрицы и первой пары праймеров, специфичных к фрагменту 5'-нетранслируемой области генома ВГС; ! (б) асимметричную амплификацию фрагмента 5'-нетранслируемой области генома ВГС с использованием в качестве матрицы продукта ОТ-ПЦР, полученного на стадии (а), второй пары специфичных праймеров и смеси четырех дезоксинуклеозидтрифосфатов, в которой один из четырех дезоксинуклеозидтрифосфатов является флуоресцентно меченым, в качестве субстрата, с получением преимущественно одноцепочечного флуоресцентно меченого фрагмента; ! (в) обеспечение олигонуклеотидного микрочипа для идентификации генотипа и подтипа ВГС, представляющего собой подложку, содержащую множество дискретных элементов, в каждом из которых иммобилизован уникальный олигонуклеотидный зонд, имеющий последовательность, комплементарную последовательности одноцепочечного фрагмента, полученного на стадии (б), и выбранную из группы, включающей: а) генотипспецифичные для каждого из генотипов ВГС последовательности фрагмента 5'-нетранслируемой области и б) подтипспецифичные для каждого из подтипов ВГС последовательности фрагмента 5'-нетранслируемой области; ! (г) гибридизацию амплифицированного меченого продукта, полученного на стадии (б), на олигонуклеотидном микрочипе с образованием дуплексов с иммобилизованными зондами в условиях, обеспечивающих разрешение в один нуклеотид между образующимися в резул� |
