胰岛素样分泌细胞的制备法及所用的组合培养基

摘要

本发明公开了一种制备胰岛素样分泌细胞用的组合培养基，由分别独立的培养基I、培养基II和培养基III组成；培养基I为：DMEM高糖培养基，胎牛血清，碱性成纤维细胞生长因子，二甲基亚砜和葡萄糖；培养基II为：无血清DMEM/F12培养基，葡萄糖，尼克酰胺，表皮生长因子，碱性成纤维细胞生长因子，exendin-4，B27添加剂和N2添加剂；培养基III为：RPMI 1640培养基，葡萄糖，尼克酰胺，4-羟乙基哌嗪乙磺酸，肝细胞生长因子，激活素A和exendin-4。本发明还同时公开了利用上述组合培养基进行的胰岛素样分泌细胞制备法。本发明能促进hBM-MSC分化为具有纠正糖尿病高血糖状态的胰岛素样分泌细胞。

主权项

1、一种组合培养基，其特征是：由分别独立的培养基I、培养基II和培养基III组成；培养基I为：DMEM高糖培养基，1-2％胎牛血清，9-11ng/ml碱性成纤维细胞生长因子，1％二甲基亚砜和17-25mmol/l葡萄糖；培养基II为：无血清DMEM/F12培养基，15-19mmol/l葡萄糖，9-11mmol/l尼克酰胺，18-22ng/ml表皮生长因子，18-22ng/ml碱性成纤维细胞生长因子，10nmol/lexendin-4，1％B27添加剂和1％N2添加剂；培养基III为：RPMI 1640培养基，10-12mmol/l葡萄糖，9-11mmol/l尼克酰胺，9-11mmol/l4-羟乙基哌嗪乙磺酸，90-110pmol/l肝细胞生长因子，1.5-2.5nmol/l激活素A和9-11nmol/lexendin-4。