用胚胎干细胞制备转基因禽类的方法

摘要

本发明涉及培养禽类胚胎干(ES)细胞的方法，该方法包含下列步骤：a)将起源于受精未孵育的禽卵胚盘的ES细胞用添加下列成分的基础培养基悬浮：胰岛素样生长因子1(IGF-1)和纤毛神经营养因子(CNTF)；以及动物血清；和可选的至少一种选自白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素6受体(IL-6R)、干细胞因子(SCF)、成纤维细胞生长因子(FGF)、白血病抑制因子(LIF)、白细胞介素11(IL-11)、制瘤素或心营养素的生长因子；b)将步骤a)获得的ES细胞悬浮液接种于饲养细胞层上并继续培养ES细胞，使其至少传2至10代；c)可选地将至少一种选自SCF、FGF、IL-6、LIF、制瘤素、心营养素或IL-11的生长因子从培养基中去除；d)用步骤c)的培养基在饲养细胞层上继续培养ES细胞。

主权项

1、一种培养禽类胚胎干(ES)细胞的方法，该方法包含下列步骤：a)将起源于受精未孵育的禽卵胚盘的ES细胞用添加下列成分的基础培养基悬浮：-胰岛素样生长因子1(IGF-1)和纤毛神经营养因子(CNTF)；和-动物血清；和-可选的，至少一种选自白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素6受体(IL-6R)、干细胞因子(SCF)、成纤维细胞生长因子(FGF)、白血病抑制因子(LIF)、白细胞介素11(IL-11)、制瘤素或心营养素的生长因子；b)将步骤a)获得的ES细胞悬浮液接种于饲养细胞层上并继续培养ES细胞，使其至少传2至10代；c)可选地将至少一种选自SCF、FGF、IL-6、IL-6R、LIF、制瘤素、心营养素或IL-11的生长因子从培养基中去除；d)用步骤c)的培养基在饲养细胞层上继续培养ES细胞。