发明名称 |
一种生产α-干扰素的纯化方法 |
摘要 |
本发明公开了一种生产α-干扰素的纯化方法,包括发酵、粗提发酵液、阳离子层析柱纯化、硫酸铵纯化、Sephacryl S-200层析柱纯化、Sephadex G-75色谱柱纯化等步骤,其中在层析之前先去热原。本发明方法无需要单克隆抗体层析柱,能经济、快速、高效地的纯化获得纯度高于97%α-干扰素,具有广阔的应用前景。 |
申请公布号 |
CN101475975A |
申请公布日期 |
2009.07.08 |
申请号 |
CN200810153999.8 |
申请日期 |
2008.12.11 |
申请人 |
天津瑞普生物技术股份有限公司 |
发明人 |
王丽娟;苏建东;李旭东 |
分类号 |
C12P21/04(2006.01)I;C07K1/36(2006.01)I;C07K1/34(2006.01)I;C07K1/18(2006.01)I;C07K1/16(2006.01)I;C12R1/84(2006.01)N;C12R1/19(2006.01)N |
主分类号 |
C12P21/04(2006.01)I |
代理机构 |
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代理人 |
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主权项 |
1、一种生产α-干扰素的纯化方法,步骤包括:(1)重组菌株进行发酵;(2)离心发酵液(6000rpm,离心15min)取上清,通过微滤除杂、超滤浓缩;(3)用醋酸调节浓缩液的pH至5,并过阳离子层析柱(CM Sepharose柱层析),收集0.45mol/L的目标洗脱峰;(4)加入硫酸铵30%(v/v)至稍混浊,离心取上清(7000rpm,离心10min);(5)过Sephacryl S-200层析柱,通过SDS-PAGE检测收集目标洗脱峰;(6)过Sephadex G-75色谱柱,通过SDS-PAGE检测收集目标洗脱液;(7)得到纯度高于97%的干扰素原液,置于4℃保存。 |
地址 |
300300天津市东丽开发区六经路6号 |