发明名称 一种生产α-干扰素的纯化方法
摘要 本发明公开了一种生产α-干扰素的纯化方法,包括发酵、粗提发酵液、阳离子层析柱纯化、硫酸铵纯化、Sephacryl S-200层析柱纯化、Sephadex G-75色谱柱纯化等步骤,其中在层析之前先去热原。本发明方法无需要单克隆抗体层析柱,能经济、快速、高效地的纯化获得纯度高于97%α-干扰素,具有广阔的应用前景。
申请公布号 CN101475975A 申请公布日期 2009.07.08
申请号 CN200810153999.8 申请日期 2008.12.11
申请人 天津瑞普生物技术股份有限公司 发明人 王丽娟;苏建东;李旭东
分类号 C12P21/04(2006.01)I;C07K1/36(2006.01)I;C07K1/34(2006.01)I;C07K1/18(2006.01)I;C07K1/16(2006.01)I;C12R1/84(2006.01)N;C12R1/19(2006.01)N 主分类号 C12P21/04(2006.01)I
代理机构 代理人
主权项 1、一种生产α-干扰素的纯化方法,步骤包括:(1)重组菌株进行发酵;(2)离心发酵液(6000rpm,离心15min)取上清,通过微滤除杂、超滤浓缩;(3)用醋酸调节浓缩液的pH至5,并过阳离子层析柱(CM Sepharose柱层析),收集0.45mol/L的目标洗脱峰;(4)加入硫酸铵30%(v/v)至稍混浊,离心取上清(7000rpm,离心10min);(5)过Sephacryl S-200层析柱,通过SDS-PAGE检测收集目标洗脱峰;(6)过Sephadex G-75色谱柱,通过SDS-PAGE检测收集目标洗脱液;(7)得到纯度高于97%的干扰素原液,置于4℃保存。
地址 300300天津市东丽开发区六经路6号
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