小儿风热清合剂的质量控制方法

摘要

本发明公开了小儿风热清合剂的质量控制方法，该方法采用高效液相色谱法对小儿风热清合剂中的桅子苷进行含量测定，并对多种有效物质进行鉴别，该方法是依据国家药典会国家标准提高要求，体现了操作简单、节约检测成本、降低试剂毒性等优点。

主权项

1、一种小儿风热清合剂的质量控制方法，其特征在于该方法包括如下鉴别和/或含量测定方法中的一种或几种：鉴别：(1)取小儿风热清合剂10-50ml，加稀盐酸调pH值至1～2，置分液漏斗中，用溶剂乙醚、60～90℃石油醚或三氯甲烷提取1-3次，每次10-30ml，弃去溶剂乙醚、60～90℃石油醚或三氯甲烷液，再用乙酸乙酯提取2-4次，每次10-30ml，合并乙酸乙酯液，水浴蒸干，残渣加甲醇1-5ml溶解，作为供试品溶液；另取牛蒡苷对照品，加甲醇制成每1ml含1-5mg的溶剂，作为对照品溶液；照中国药典2005年版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取对照品溶液5μl、供试品溶液10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水为10-50∶1-10∶1-5为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上显相同颜色的斑点；(2)取小儿风热清合剂10-50ml，加稀盐酸调pH值至1～2，置分液漏斗中，用溶剂乙醚、60～90℃石油醚或三氯甲烷提取1-3次，每次10-30ml，弃去溶剂乙醚、60～90℃石油醚或三氯甲烷液，再用乙酸乙酯提取2-4次，每次10-30ml，合并乙酸乙酯液，水浴蒸干，残渣加甲醇1-5ml溶解，作为供试品溶液；另取黄芩苷对照品，加甲醇制成每ml含0.5-5mg的溶液作为对照品溶液；照中国药典2005年版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取对照品溶液5μl、供试品溶液2μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水为3-10∶1-5∶0.1-5∶0.1-5为展开剂，展开，取出，晾干，喷以1％三氯化铁乙醇溶液；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上显相同颜色的斑点；(3)取小儿风热清合剂10-50ml，注入已处理好的内径1.5cm、柱高25cm的D101型大孔吸附树脂柱内，先用100-500ml的蒸馏水以1-5ml/min的速度洗脱，弃去洗脱液，再用50-95％的乙醇洗脱，收集洗脱液于100ml量瓶至刻度，摇匀，滤过，取续滤液20-80ml置蒸发皿，蒸干，残渣加甲醇1-5ml溶解，作为供试品溶液；另取栀子苷对照品，加甲醇制成每1ml含0.5-5mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典2005年版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取供试品溶液10μl、对照品溶液5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-乙腈-氨水为1-10∶1-5∶0.1-1∶0.1-1为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点；(4)取小儿风热清合剂10-50ml，用氨试液调pH值至10，用溶剂乙醚、60～90℃石油醚或三氯甲烷萃取1-3次，每次10-20ml，分取溶剂乙醚、60～90℃石油醚或三氯甲烷液，蒸干，残渣加甲醇或乙醇1-5ml使溶解，作为供试品溶液；另取连翘对照药材1-5g加水50-100ml，煎煮10-60分钟，滤过，滤液浓缩至10-50ml，同法制备作为对照药材溶液；照中国药典2005年版一部附录VI B薄层色谱法试验；吸取上述两种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇为2-10∶2-10∶1-5为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰；供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同的颜色的斑点；(5)取小儿风热清合剂10-50ml，加水5-20ml，摇匀，加稀盐酸调节pH值至1～2，离心10分钟，分取上清液加溶剂乙醚、60～90℃石油醚或三氯甲烷、乙酸乙酯10-30ml振摇提取2-3次，蒸干，残渣加溶剂乙醚、60～90℃石油醚或三氯甲烷、乙酸乙酯1-5ml使溶解，作为供试品溶液；另取绿原酸对照品，加甲醇制成每1ml含0.1-1mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典2005年版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各2μl，分别点于同一聚酰胺薄膜上，以乙酸乙酯-甲醇-甲酸为5-10∶0.1-5∶0.1-5为展开剂，展开，取出，晾干，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；(6)取小儿风热清合剂10-50ml，用溶剂乙醚、365nm石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯或水饱和正丁醇振摇提取1-3次，每次10-50ml，合并溶剂乙醚、60～90℃石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯或水饱和正丁醇液，用2％氢氧化钠溶液10-30ml洗涤，再用溶剂乙醚、60～90℃石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯或水饱和正丁醇洗涤2次，每次30ml，弃去洗液，溶剂乙醚、60～90℃石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯或水饱和正丁醇溶液蒸干，残渣加甲醇1-5ml使溶解，作为供试品溶液；另取柴胡对照药材1-5g，加水50-100ml，加热微沸1-5小时，滤液同法制成对照药材溶液；照中国药典2005年版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液10μl、对照药材溶液5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-水为10-50∶5-30∶0.5-10为展开剂，展开，取出晾干，喷以2％对二甲氨基苯甲醛的40％硫酸溶液，60-100℃加热至斑点显色清晰；置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光主斑点；(7)取小儿风热清合剂10-50ml，置分液漏斗中，加溶剂乙醚、60～90℃石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯或水饱和正丁醇10-30ml振摇提取1-3次，分取溶剂乙醚、60～90℃石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯或水饱和正丁醇液，蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液；另取柚皮苷对照品，加甲醇制成每1ml含0.1-1mg的溶液，作为对照品溶液；照中国药典2005年版一部附录VI B薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液10μl、对照品溶液5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-丁酮-甲酸-水为2-10∶1-5∶0.1-3∶0.1-5为展开剂，展开，取出晾干，喷以2％三氯化铝乙醇溶液，在105℃加热数分钟，置365nm紫外光灯下检视；供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点；含量测定：精密量取小儿风热清合剂10-50ml，注入已处理好的内径1.5cm、柱高25cm的D101型大孔吸附树脂柱内，先用100-500ml的蒸馏水以1-5ml/min的速度洗脱，弃去洗脱液，再用50-95％的乙醇洗脱，收集洗脱液于100ml量瓶至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得供试品溶液；精密称取经五氧化二磷减压干燥12小时以上的栀子苷对照品10mg，置25ml量瓶中，加甲醇溶解至刻度，摇匀，精密量取1ml，置10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，每1ml中含栀子苷40μg，即得对照品溶液；用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-水为5-30∶95-70为流动相，检测波长238nm，理论板数按栀子苷峰计算应不低于2000；照高效液相色谱法测定，分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl注入液相色谱仪，测定，即得，每1ml小儿风热清合剂含栀子以栀子苷C17H24O10计，不得少于0.16mg。