反推洗脱逆流色谱方法

摘要

本发明公开的反推洗脱逆流色谱方法，首先将液－液两相溶剂中的上相做为固定相，下相做为流动相，采用“首端”至“尾端”的洗脱方式，或者将下相做为固定相，上相做为流动相，采用“尾端”至“首端”的洗脱方式，将被分离物质在液－液两相溶剂体系中的分配系数小于2的物质洗脱出色谱柱；然后在保持色谱原来的固定相和流动相都不变的前提下，通过一个两位多通阀改变逆流色谱的洗脱方向，利用流动相将保留在固定相中的被分离物质从色谱柱推出。本发明充分利用了逆流色谱的液体固定相的特性，可大大提高逆流色谱的极性区间、分离效率，缩短分离时间，减少有机溶剂消耗，操作简便，本发明可广泛应用于各类有机物质、天然产物和生物分子的分析和分离制备等领域。

主权项

1.反推洗脱逆流色谱方法，其特征在于步骤如下：首先将液-液两相溶剂中的上相做为固定相，下相做为流动相，采用“首端”至“尾端”的逆流色谱洗脱方式，将被分离物质在所选定的液-液两相溶剂体系中的分配系数小于2的物质洗脱出色谱柱，然后在保持色谱原来的固定相和流动相都不变的前提下，通过一个两位多通阀改变逆流色谱的洗脱方向，利用流动相将保留在固定相中的被分离物质从色谱柱的首端“推出”；或者先将液-液两相溶剂中的下相做为固定相，上相做为流动相，采用“尾端”至“首端”的逆流色谱洗脱方式，将被分离物质在所选定的液-液两相溶剂体系中的分配系数小于2的物质洗脱出色谱柱，然后在保持色谱原来的固定相和流动相都不变的前提下，通过一个两位多通阀改变逆流色谱的洗脱方向，利用流动相将保留在固定相中的被分离物质从色谱柱的尾端“推出”。