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Procedimiento homogéneo para detectar por lo menos un polinucleótido diana en una muestra que comprende las etapas siguientes: - poner en contacto una muestra que comprende dicho polinucleótido o el polinucleótido que forma ácidos nucleicos o derivados de los mismos con una sonda oligonucleotídica marcada con un solo tipo de marcador, - excitar el marcador, y - controlar la intensidad de la señal de dicho marcador para indicar la presencia o ausencia en una muestra de dicho polinucleótido diana, caracterizado porque el marcador es un quelato lantánido fluorescente que contiene un grupo fotoabsorbente, la señal de dicho marcador aumenta o disminuye bajo la hibridación de la sonda oligonucleotídica cuando dicha muestra se pone en contacto con el polinucleótido diana y dicha sonda oligonucleotídica se hibrida selectivamente a dicho polinucleótido diana y se mide dicho marcador por fluorometría con resolución temporal y porque el marcador se escinde químicamente de la sonda oligonucleotídica tras la hibridación.
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