一种鱼类的雄核发育方法

摘要

本发明涉及一种鱼类的雄核发育技术。本发明以四倍体鲫鲤产生的二倍体精子为材料，用紫外线照射失活金鱼卵子的核DNA的遗传活性，然后用二倍体精子与遗传失活的卵子混合，不经染色体加倍处理，受精卵孵化出的鱼苗经饲养，发育成雌雄两性可育的雄核发育鱼，雄核发育鱼自交形成了存活的四倍体后代，为改良鱼类性状提供重要的二倍体配子资源。

主权项

1.一种鱼类的雄核发育方法，其特征在于，利用四倍体鲫鲤产生的二倍体精子为原始材料，与遗传灭活的金鱼的卵子混合，无需雄核加倍处理，由精子的遗传物质启动雄核发育，最终获得两性可育型雄核发育后代，具体方法如下：(1).挤出达到性成熟的雌性金鱼的卵子置于盛有卵巢液的培养皿中，卵巢液刚刚盖过卵子；(2).把盛有卵子的培养皿放在垫有冰袋的摇床上，旋转速度为30～40转/分，并置于2支功率分别为15瓦的紫外灯下照射处理，紫外灯与卵巢液的距离为10～12厘米，照射时间为3分钟；(3).将照射过的卵子与四倍体鲫鲤产生的二倍体精子混合，并用干净的鸡毛充分搅拌精子和卵子，1～2分钟后把受精卵平铺到盛有清水的培养皿中，无需染色体加倍处理，胚胎在20～21℃水温下孵化；(4).孵化出的鱼苗经养殖，获得雌雄两性可育的雄核发育鱼，雄核发育二倍体鲫鲤的性成熟年龄一般为2年，性成熟后能大量产生二倍体配子，选择雌、雄性成熟的雄核发育鱼，将其产生的精液和卵子混合，获得存活的自交后代，这些二倍体配子可以用来制备新型的四倍体鱼和三倍体鱼；所述卵巢液配方如下：4.11g BSA/升，3.8mmol Na2HPO4，118.0mmol NaCl，12.7mmolKCl，0.7mmol MgCl2·6H20，2.7mmol CaCl2，5.5mmol酪氨酸和5.5mmol甘氨酸，pH值调至8.14。