一种检测中肋骨条藻生长率的方法

摘要

本发明公开了一种检测中肋骨条藻生长率的方法，包括：a.提取中肋骨条藻RNA；b.分离并克隆中肋骨条藻PCNA基因部分序列；c.克隆中肋骨条藻Cytb基因部分序列；d.根据PCNA与Cytb基因序列，建立检测中肋骨条藻PCNA与Cytb基因的实时荧光定量PCR的标准曲线；e.以PCNA为目的基因、以Cytb为管家基因，根据中肋骨条藻PCNA基因相对表达量REQ检测中肋骨条藻生长率。本发明提供了一种准确估算中肋骨条藻现场生长率的技术方法，用于估算浮游藻类生产力、研究浮游藻种群变迁、构建生态动力学模型乃至赤潮预测等。

主权项

1.一种检测中肋骨条藻生长率的方法，其特征在于，包括以下步骤：a.提取中肋骨条藻RNA；b.分离并克隆中肋骨条藻PCNA基因部分序列，通过3’RACE对获得的中肋骨条藻PCNA序列进行3’端延伸，获得750～850bp的PCNA序列；c.克隆中肋骨条藻Cyt b基因部分序列；d.将所述PCNA序列基因、所述Cyt b基因部分序列导入质粒，并根据转载所述PCNA序列基因、转载所述Cyt b基因部分序列的质粒构建检测中肋骨条藻PCNA与Cyt b基因的实时荧光定量PCR的标准曲线；e.以PCNA为目的基因、以Cyt b为管家基因，根据中肋骨条藻PCNA基因相对表达量REQ检测中肋骨条藻生长率。