一种荧光标记ABO基因分型的方法及其试剂盒

摘要

本发明涉及分子生物学、法医学、遗传学领域，具体的是对犯罪生物物证的荧光标记ABO基因分型的方法及其试剂盒。该方法根据ABO决定基因的序列多态性，设计一组等位基因序列特异性引物，并在其中两条引物5’端分别使用NED及TMR荧光染料标记，应用DNA遗传分析仪进行PCR产物片段分析，判定样品ABO基因型。本发明方法较以往检验方法不仅检验灵敏度大为提高，而且操作简便、快速、结果客观准确，实用性强，是法医物证ABO血型鉴定的理想手段。

主权项

1、一种荧光标记ABO基因分型方法，其特征在于包括如下步骤：1)根据ABO基因序列合成特异性引物，并在其中两条引物5’端分别使用NED或TMR荧光染料标记；2)DNA的提取：采用Chelex-100或有机溶剂萃取的方法提取待测样品中的DNA提取液；3)PCR扩增：将0.2-10ng DNA提取液加入到含有引物的PCR试管中，而后将其置于PCR仪中进行扩增：95℃变性11min，随后90-97℃变性30s，50-60℃退火30s，70-75℃延伸30s，25-40个循环后，70-75℃延伸5-60min；4)扩增产物分析：将扩增后的产物置于DNA片段分析仪进行电泳分离。5)结果分析：使用GeneMapper 3.2分析软件，对所有样品进行分析。