| 主权项 |
1.一种制造人类抗体之方法,其中该抗体对受体具有协同剂、拮抗剂与/或反向协同剂之特性,系包含有下列步骤:(a)利用该受体之各细胞外部位之生物资讯学特征定义出该受体各别细胞外部位之胜片段;(b)将该胜片段与一T辅助细胞抗原决定位偶合,所产生之复合胜至少含有一T辅助细胞抗原决定位;(c)制备一具有该偶合片段氨基酸序列之免疫原;(d)以该免疫原进行体外刺激人类淋巴细胞;(e)监别并筛选产生可辨识该受体之抗体之人类淋巴细胞;以及(f)收集该抗体。2.如申请专利范围第1项所述之方法,其中与该细胞外部位相符合之该胜片段氨基酸序列具有与SEQID NOs:2-7至少75%之氨基酸序列一致性。3.如申请专利范围第1项所述之方法,其中该受体系人类CD152。4.如申请专利范围第1项所述之方法,其中该T辅助细胞抗原决定位包含有一示于SEQ ID NO:1之氨基酸序列。5.如申请专利范围第1项所述之方法,其中该受体各细胞外部位之生物资讯学特征系为疏水性、变动性或表面可能性。6.一种结合于偶合片段之抗体,其中该偶合片段具有一T辅助细胞抗原决定部位及相符于受体各细胞外部位之胜片段。7.一种监别作为受体之体外协同剂、拮抗剂与/或反向协同剂抗体药理功效之方法,系包含有下列步骤:(a)提供一人类淋巴细胞、一分裂促进剂、一配体及选择性地多株活化剂;(b)将该分裂促进剂或多株活化剂加入个别容器并增加配体浓度,形成一混合物;(c)提供含一分裂促进剂之第一控制组培养基,与含一受体天然协同剂之第二控制组培养基;(d)将人类淋已细胞培养于该第一控制组培养基、该第二控制组培养基及该复数个配体与分裂促进剂混合物中;(e)决定各培养基及各混合物中人类淋巴细胞程序性凋亡与/或复制活化之程度;以及(f)利用该混合物配体浓度增加之程序性凋亡与/或复制活化程度决定配体对受体之效用。8.如申请专利范围第7项所述之方法,其中该人类淋巴细胞系周边血液单核细胞。9.如申请专利范围第7项所述之方法,其中该分裂促进剂或多株活化剂系植物血凝素、洋刀豆血球凝集素A、美洲商陆分裂促进剂、12-十四酸佛波脂-13-乙酸盐及超抗原,以单独或混合方式使用。10.一种制备人类抗体之方法,该抗体可辨识生理上之受体,系包含有下列步骤:(a)提供一源自于静息人类捐赠者之淋巴细胞;(b)取依生物资讯学特征设计之合成抗原,在体外对该淋巴细胞进行免疫反应;(c)加入Epstein-Barr病毒于该免疫淋巴细胞;(d)监别EB病毒感染之细胞所产生可辨识该受体之抗体;以及(e)筛选步骤(d)所产生抗体之药理学功能。图式简单说明:图1A系表示T细胞表面上CD152受体之同源二聚体蛋白质结构与三个类似免疫球蛋白CDR区之相对位置。图1B系转译于cDNA(基因库编号L15006,NCBI蛋白质编号P16410)之人类CD152氨基酸序列。星号显示成熟胜、膜间区及胞内区之起点。CDR1、CDR2与CDR3类似区以方框表示。图2A、2B与2C系分别描述人类CD152之CDR1与相连区之疏水性、链变动性与表面可能性。图2D、2E与2F系分别描述CDR2与相连区之疏水性、链变动性与表面可能性。图2I、2J与2K系分别描述CDR3与相连区之疏水性、链变动性与表面可能性。箱型区系指CDR类似区,其氨基酸序列显示于下方。箭头标示出所预测氨基酸组成之链结构。图3显示PHA刺激之人类PBMC细胞分化()与凋亡(■)之反应情形。图3A、3B、3C、3D与3E系分别为PHA单独刺激(1.25、5及20g/ml)、1.25g/ml PHA伴随交联性CD80(0.2、1及5g/ml)、抗-CDR1、抗-CDR2及抗-CDR3抗体(0.1、1及10g/ml)所得之结果。 |
