检测对滑膜增生因子活性的调节作用的方法

摘要

本发明提供评价对脯氨酰4－羟化酶活性的调节的方法，使用这些评价方法的筛选方法，筛选可用于风湿性关节炎或纤维化的治疗或预防的化合物的方法。本发明还涉及检测对滑膜增生因子的脯氨酰4－羟化酶α亚基(P4HAl)泛素化作用的调节活性的方法，基于这些方法筛选对滑膜增生因子的P4HAl泛素化活性具有调节作用的化合物的方法。筛选出的化合物可用于治疗和/或预防由脯氨酰4－羟化酶活性异常引起的疾病，例如纤维化和风湿性关节炎。

主权项

1.一种检测受试化合物对滑膜增生因子泛素化作用的调节活性的方法，其包括步骤：a)在能使底物泛素化的条件下，于受试化合物存在时将滑膜增生因子或其同系物与底物保温，a′)将(i)底物或者(ii)滑膜增生因子或其同系物与受试化合物接触，并在能使底物泛素化的条件下与(i)和(ii)的另一者保温，或者a”)在能使底物泛素化的条件下将滑膜增生因子或其同系物与底物保温，并将它们与受试化合物接触；b)在步骤a)，a′)，和a″)任一步后测定底物泛素化的水平；和c)当底物泛素化水平与没有受试化合物时测得的泛素化水平有差异时，检测受试化合物对滑膜增生因子使底物泛素化的作用的调节活性，其中底物是脯氨酰4-羟化酶α亚基或其同系物。