水稻白叶枯病菌快速分离方法

摘要

本发明涉及水稻白叶枯病菌快速分离方法，属微生物技术领域。将含目标病原细菌的水稻病组织，经用75％洒精消毒60－90秒后，用无菌水冲洗，将病组织置于无菌载玻片上，滴加无菌水，室温摆放5－15min，待病原菌从病组织中喷出到切口处的水中，用移菌环沾取含菌液划线于适于水稻白叶枯病菌生长的NA或SX培养基上，25－28℃培养，即可得到相应的目标细菌。本发明分离细菌快速、准确、污染率低、纯度高、菌株变异极小，保持了病原菌野生型的特性。

主权项

1.水稻白叶枯病菌快速分离方法，其步骤是：(1)标样选择：选取具有典型症状的水稻白叶枯病标本，在发病扩展前沿病键交界处，剪取0.5-1.5cm组织块；(2)消毒：首先将组织块用自来水冲洗，选用75％洒精消毒60-90秒，然后用无菌水冲洗3次，稍凉干后用剪刀修剪，去除多余的健康组织；(3)先将载玻片放入95％乙醇中浸泡，在酒精灯火上轻烧，将消毒过的组织块放在灭菌的载玻片上，两端滴上1滴无菌水，室温静置5-15min，待喷菌现象出现后，用移菌环沾含菌液划线于普通NA或SX培养基上；(4)细菌培养：24-28℃培养基箱中培养48-72h后观察，根据菌落形态、颜色等细菌培养性状，进行挑选，然后将细菌纯培养保存。