一种诊断非典型性肺炎试剂盒的制备方法

摘要

本发明公开了一种诊断非典型肺炎试剂盒的制备方法，其步骤是：提供一种早期诊断非典型性肺炎的诊断试剂盒，为早期诊断患有由SARS冠状病毒所引起的非典型性肺炎传染病的病人提供了一种快速，准确的诊断试剂盒。该诊断试剂盒由包被有抗编码SARS冠状病毒S蛋白的完整基因或其片段的蛋白的抗体的96孔板和标记有显色的酶，如辣根过氧化物酶或碱性磷酸酶的抗编码SARS冠状病毒S蛋白的完整基因或其片段的蛋白的抗体溶液。以及显色液所组成。该诊断试剂盒可检测全血中引起非典型性肺炎传染病的SARS冠状病毒颗粒及其抗原。

主权项

1、一种诊断非典型肺炎试剂盒的制备方法，包括下列步骤：A、以基因合成方法或RT-PCR方法得到编码SARS冠状病毒S蛋白的完整基因或其片段；B、将A所得到的编码SARS冠状病毒S蛋白的完整基因或其片段克隆到原核表达载体上；C、将B所得到的带有SARS冠状病毒S蛋白的完整基因或其片段的重组原核表达载体，通过转化的方法转入到大肠杆菌中，并进行诱导表达；D、将C所得到的SARS冠状病毒S蛋白的完整基因或其片段编码的蛋白通过蛋白质纯化的方法得到提纯的SARS冠状病毒S蛋白的完整基因或其片段编码的蛋白；E、将D所得到的蛋白以单独形式或与佐剂混合的方式免疫哺乳动物；F、收集E所免疫的哺乳动物的血清；G、将F所得到的血清，按ELISA方法包被到以塑料为材料的96孔板上，并用牛奶或牛血清白蛋白封闭处理；H、将F所得到的血清，按ELISA方法标记上同底物反应后能显色的酶；I、将G所得到的包被有抗SARS冠状病毒S蛋白的完整基因或其片段编码的蛋白的抗体的96孔板和经过H所标记的抗SARS冠状病毒S蛋白的完整基因或其片段编码的蛋白的抗体及其现色底物和反应终止液，组成非典型肺炎诊断试剂盒。