提高棉花花粉管通道导入基因转化率的方法

摘要

本发明涉及一种提高棉花花粉管通道导入基因转化率的方法，属于生物技术领域。采取正交试验设计，探讨了不同缓冲液成分对棉花花粉管通道导入外源总DNA或者质粒DNA转化率的影响，筛选出了适宜提高棉花花粉管通道导入基因转化率的缓冲液配方，其主要成分是在TE缓冲液中加入0.01μg·μl^－1－0.05μg·μl^－1。甲基磺酸乙酯(ethylmethane sulfonate，简称EMS，Sigma公司产品)。利用花粉管通道技术，将含有IPT基因的表达载体pBG121导入不同的陆地棉品种(中棉所10号、中棉所24号和中棉所36号)中，比较改进缓冲液和传统缓冲液对棉花转化率的影响，应用结果表明：使用改进缓冲液的棉花平均转化率比传统的缓冲液的平均转化率提高了两倍。

主权项

1一种提高棉花花粉管通道导入基因转化率的方法，其特征在于导入基因缓冲液的组成成分为：三羟甲基氨基甲烷-盐酸(Tris-HCl)，乙二胺四乙酸二钠(EDTA-Na2)，氯化钠(NaCl)、甲基磺酸乙酯(EMS)和脱氧核糖核酸(DNA)。