| 摘要 |
Un proceso para producir una forma libre purificada, biologicamente activa, del interferon gamma humano recombinante (HIG) mediante espresioncitoplasmática en Escherichia coli (E. coli), que comprende los pasos de: a) hacer crecer un cultivo de célul as de E. Coli inoculadas con un plásmido que llevael gen para HIG en un fermentador; b) inducir el cultivo hasta una DO de 5,0 con un inductor seleccionado del grupo consistente en isopropil-beta-D-tiogalactopiranosida (IPTG), ácido indolacrílico (IA A), ácido indolpropionico (IPA) y lactosa; c) cosechar el caldo de fermentacion 5 horas después de lainduccion; d) inactivar a las células en el caldo de recoleccion; e) concentrar las células inactivadas mediante clarificacion primaria a través de u nmicrofiltro; f) desmenuzar las células inactivadas concentradas mediante homogeneizacion a 600 bar (60 MPa) en tres pasadas; g) centrifugar el homogenatofinal; h) purificar la forma libre del interferon gamma humano recombinante del sobrenadante del paso (g) por medio de cromatografía de intercambio cationico;e i) recuperar el interferon gamma humano recombinante purificado después del paso final de diálisis o cromatografía de filtracion en gel.
|
