| 主权项 |
1.一种应用铁皮石斛激素自养型茎尖培养药材的方法，其特征在于该方法包括下列步骤：(1)按配方配制培养基 生长培养其mg/L(NH4)2SO4 450KNO3 2800CaCl22H2O. 150MgSO47H2O 200KH2PO4 420KI 0.8H3BO3 1.5MnSO4.4H2O 5ZnSO4.7H2O 1.5FeSO4.7H2O 27.8Na2.EDTA.2H2O 37.3烟酸 0.5盐酸吡哆醇 0.5盐酸硫胺素 1.0蔗糖 2％w/vpH 5.6～5.8(2)按本发明的培养基配方组成，见表1，配制培养基。用pH计测定pH值，并用1N的HCl及1N的NaOH调节培养基pH值在5.6-5.8范围内，种子培养基须加入0.8％的琼脂。然后分装于培养瓶中，每瓶50～60ml，进行高压灭菌，压力为1.0-1.2Kg/cm2，时间为15-25分钟；(3)选择生长良好、色泽深绿、大小适中的茎尖为种源，在超净工作台中接种于以上准备好的固体培养基中进行培养，接种量，以鲜重计，为每瓶3g。接种后的培养瓶放入培养室中的培养，培养条件为：光照1500-2500lux，温度20～28℃，每2月继代一次；(4)继代培养时，进行选优，祛除颜色发黄，生长不良的的茎尖，选择优良茎尖继续培养，一旦发现整体生长延缓，有效成分含量降低，则从野生铁皮石斛重新选育。(5)大规模培养时，选择生长良好的种子茎尖，按每瓶4g，以鲜重计接种，接种后移入培养温室中进行培养，应用自然光照，光线太强时，用遮阳网遮阴，温度不足20℃时采用加温措施。待培养液用完时，根据长势终止培养或补液继续培养。 |
