摘要 |
"PLASMìDEO, REGIãO DE CONTROLE DE REPLICAçãO SENSìVEL A TEMPERATURA, E, PROCESSO PARA CRIAR UMA BACTéRIA CORINEFORME". Uma bactéria corineforme em que um fragmento de DNA é incorporado em seu cromossomo é preparada por (a) obter um plasmídeo recombinante através de ligação de um fragmento de DNA tendo uma seq³ência homóloga a um gene presente no cromossomo de uma bactéria corineforme para um plasmídeo que tem um segmento de região de controle de replicação de tipo selvagem de uma seq³ência de nucleotídeo particular incluindo uma mutação e é replicável de modo autónomo em uma célula de bactéria corineforme a uma temperatua de cultura maior do que 31°C mas não replicável de modo autónomo na célula a uma temperatura de 31°C ou maior, (b) introduzir o plasmídeo recombinante na célula de bactéria corineforme, (c) cultivar a bactéria a uma temperatura de 31°C ou maior, (d) provocar a recombinação homóloga entre o fragmento de DNA e o gene presente no cromossomo da bactéria corineforme e tendo uma seq³ência homóloga ao fragmento de DNA, e (e) selecionar uma bactéria corineforme em que o fragmento de DNA é incorporado em seu cromossomo. De acordo com a presente invenção, provê-se um processo para modificar de modo eficiente os traços genéticos de um hospedeiro em um curto período de tempo por obtenção de um plasmídeo sensível a temperatura a partir de um plasmídeo não demonstrando homologia com plasmídeos sensíveis a temperatura já registrados ou não demonstrando incompatibilidade com os mesmos.
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