PROCEDIMIENTO PARA LA PRODUCCION DE UN PEPTIDO FISIOLOGICAMENTE ACTIVO QUE CONTIENE UN RESTO CISTEINA.

摘要

UN PROCESO PARA LA PRODUCCION DE UN PEPTIDO FISIOLOGICAMENTE ACTIVO (PEPTIDO DIANA) QUE CONTIENE UN RESIDUO DE CISTEINA, Y COMPRENDE LAS ETAPAS DE: 1) CULTIVAR ESCHERICHIA COLI TRANSFORMADO CON UN PLASMIDO CAPAZ DE EXPRESAR UNA PROTEINA DE FUSION, BAJO CONTROL DE UN PROMOTOR DE ORIGEN DE E.COLI O UN PROMOTOR DE UN ORIGEN DE FASE, DONDE LA PROTEINA DE FUSION ESTA REPRESENTADA POR LA FORMULA A-L-B, SIENDO B EL PEPTIDO DIANA QUE CONTIENE EL RESIDUO DE CISTEINA, A ES UN POLIPEPTIDO ACOMPAÑANTE QUIE CONTIENE DE 90 A 220 RESIDUOS DE AMINOACIDOS PERO NO DE CISTEINAL Y L REPRESENTA UN ENLAZADOR DE RESIDUOS DE AMINOACIDOS SITUADO ENTRE EL C TERMINAL DEL POLIPEPTIDO ACOMPAÑANTE Y EL N-TERMINAL DEL PEPTIDO DIANA; 2) DISOCIAR LAS CELULAS CULTIVADAS Y OBTENER UNA FRACCION INSOLUBLE QUE CONTIENE LA PROTEINA DE FUSION;Y 3) SOLUBILIZAR LA PROTEINA DE FUSION CON UN AGENTE SOLUBILIZANTE, Y TRATAR ELPRODUCTO SOLUBILIZADO CON UNA PROTEASA O UNA SUSTANCIA QUIMICA PARA LIBERAR Y AISLAR EL PEPTIDO DIANA.