-i(TRANS)-DOMINANT SUPPRESSOR GENES FOR OLIGOMERIC PROTEINS.

摘要

L'invention se rapporte à un procédé servant à produire des gènes suppresseurs trans-dominants qui codent pour des sous-unités mutantes de deux catégories différentes de protéines oligomères. Dans l'une de ces catégories, la protéine est composée de sous-unités dont au moins une est initialement synthétisée et qui contiennent une substance peptidique étrangère. Cette substance peptidique étrangère est ensuite retirée pendant la transformation normale par clivage au niveau d'un site de clivage protéolytique, en vue de produire la forme mature de la sous-unité. Selon la présente invention, un ADN monocaténaire codant pour la forme initiale de la sous-unité indiquée est cloné et la séquence de base de l'ADN dans la région codant pour le site de clivage protéolytique est modifiée par mutagenèse orientée sur le site, de sorte que la transformation du produit de translation du gène en la forme mature de la sous-unité est empêchée. Dans l'autre catégorie, la protéine oligomère est une protéine dans laquelle les monomères sont liés ensemble par au moins deux liaisons disulfure, dont au moins une est essentielle pour l'activité catalytique de la protéine. Dans le procédé de cette invention, un ADN monocaténaire codant pour l'une des sous-unités est cloné et la séquence de base de l'ADN dans la région codant pour un résidu de cystéine essentiel pour l'activité catalytique est modifiée par mutagenèse orientée sur le site.