FLUORESCENT TAG FOR SUGAR ELECTROPHORESIS

摘要

Procédé de séparation de mélanges de saccharides en groupes détectables distincts. Selon le procédé, l'on doit premièrement obtenir un conjugué trifonctionnel. L'on obtient le conjugué trifonctionnel en faisant réagir un mélange de saccharides avec des fractions (a) capables de fournir une charge par ionisation; (b) capables d'entrer en fluorescence sous l'effet de la lumière ultraviolette; et (c) sur lesquelles se trouve un groupe azido photoactivable. Les différentes fractions fonctionnelles peuvent être toutes présentes sur la même fraction et connectées directement aux saccharides, où elles peuvent être connectées les unes aux autres de sorte que seule une des fractions est connectée directement au saccharide. On soumet les conjugués trifonctionnels à une séparation électrophorétique afin d'obtenir des groupes séparés de conjugués dans le gel. On transfère les groupes de conjugués du gel à la surface d'une membrane que l'on expose à la lumière pendant une durée et à une fréquence de lumière suffisante pour activer le groupe azido. On fixe les groupes azido photoactivés à la surface de la membrane. Ensuite, on peut mettre en contact les conjugués trifonctionnels avec des sondes marquées telles que des protéines radiomarquées, afin de définir l'affinité des sondes vis-à-vis de saccharides particuliers.