Enzymatically inactive, immunologically active beta-galactosidase muteins.

摘要

Bei einem enzymatisch inaktiven, immunologisch aktivenβ-Galactosidase-Mutein ist im Bereich zwischen den Aminosäuren 430 und 550 mindestens eine Aminosäure der natürlichen Sequenz gegen eine andere Aminosäure ausgetauscht und die enzymatische Aktivität beträgt nicht mehr als 1 %, bezogen auf das native Enzym. Zur gentechnologischen Herstellung eines solchenβ-Galactosidase-Muteinproteins wird in einem fürβ-Galactosidase kodierenden Plasmid die DNA-Sequenz durch site-directed mutagenesis derart verändert, daß nach Expression im Bereich zwischen den Aminosäuren 430 und 550 des Proteins mindestens eine Aminosäure gegen eine andere ausgetauscht ist. Ein solches enzymatisch inaktives, immunologisch aktivesβ-Galactosidase-Mutein wird bei der immunologischen Bestimmung von Serumproteinen nach dem Prinzip des Enzym-Immunoassays (EIA) unter Verwendung des Enzymsβ-Galactosidase als Markierungsenzym zum Abfangen von Anti-β-Galactosidase-Antikörpern oder anderer auf dieβ-GAL gerichteter Bindeproteine, die das Testergebnis verfälschen können, verwendet.