PROTEINAS RECOMBINANTES PARA EL TRATAMIENTO, PREVENCION Y CONTROL DE OBESIDAD

摘要

SE REFIERE A LA PROTEINA OBESA (OB) HUMANA (DE FORMULA I) Y MURINA (DE FORMULA II) QUE COMPRENDEN PROTEINAS RECOMBINANTES, HOMOGENEAS Y BIOLOGICAMENTE ACTIVAS. TAMBIEN SE REFIERE AL METODO PARA PRODUCIR TALES PROTEINAS OBESAS, QUE COMPRENDE LAS ETAPAS DE: A) CONSTRUIR UN VECTOR DE EXPRESION, CONSTITUIDO POR: *) SECUENCIA PROMOTORA; **) SECUENCIA DE ADN QUE CODIFICA UNA PROTEINA DE FUSION; LA PROTEINA DE FUSION COMPRENDE: i) UNA PROTEINA DE FORMULA (I) o (II); Y ii) EL PEPTIDO DE SENAL PARA LA PROTEINA DE MEMBRANA EXTERNA DE LA E.COLI; B) INSERTAR EL VECTOR DE EXPRESION EN UNA CELULA HUESPED (E.COLI); C) EXPRESAR Y TRASLOCAR LA PROTEINA DE FUSION EN EL ESPACIO PERIPLASMATICO DE LA E.COLI; D) TRATAR LA CELULA HUESPED (E.COLI) CON TAMPON DE SHOCK OSMOTICO FRIO PARA LIBERAR LA PROTEINA OB HUMANA O MURINA, EXCENTA DEL PEPTIDO DE SENAL; E) PURIFICAR USANDO SECUENCIALMENTE CROMATOGRAFIA DE INTERCAMBIO DE ANIONES, CROMATOGRAFIA DE COLUMNA DE INTERACCION HIDROFOBICA Y FILTRACION DE GEL. FINALMENTE SE REFIERE A UNA COMPOSICION QUE COMPRENDE UNO O MAS CONJUGADOS DE FORMULA (III) Y (IV), DONDE: P ES UNA PROTEINA OB HUMANA O MURINA DE FORMULA (I) Y (II); n Y n` PARA (III) Y n PARA (IV) SUMAN DE 300 A 1 500 UNIDADES, ADEMAS LAS UNIDADES DE POLIETILENGLICOL COMPRENDE UN PESO MOLECULAR DE 15KDa A 60 KDa; R Y R' SON ALQUILO INFERIOR