| 主权项 |
1.一种监定化合物有可能用于治疗赘瘤的方法,其包括测定化合物的环加氧(COX)抑制活性;及测定化合物PDE5抑制活性;其中与PDE5高抑制活性相比低COX抑制活性,显示此化合物有用于治疗赘瘤的可能;其中化合物的COX抑制活性系藉:将化合物与分泌PGE2的细胞接触;及测量细胞分泌的PGE2减少,如果减少的话;其中PGE2分泌的减少与前列腺素合成活性降低有关;其中PDE活性的测定系藉:使化合物与细胞培养物接触;及测定细胞内环形GMP浓度;其中于浓度为10M时PDE抑制活性大于50%显示此化合物可进一步评估其是否可用于治疗赘瘤。2.根据申请专利范围第1项之方法,还包括测定化合物是否抑制培养物内肿瘤细胞的生长;抑制肿瘤细胞的生长进一步显示此化合物可用于治疗赘瘤。3.根据申请专利范围第1项之方法,其中化合物的COX抑制活性系藉:将化合物与纯化的环加氧接触;及如果有变化的话,测量环加氧活性的变化;其中于100M浓度COX抑制活性少于25%时,表示此化合物应进一步评估其可能用于治疗赘瘤。4.根据申请专利范围第1项之方法,其还包括测定化合物是否引起肿瘤细胞的编程性细胞死亡;其中编程性细胞死亡的诱发显示此化合物可用于治疗赘瘤。5.根据申请专利范围第4项之方法,其还包括测定化合物是否抑制样品内的肿瘤细胞的生长;其中肿瘤细胞生长的抑制显示此化合物可用于治疗赘瘤。6.根据申请专利范围第4项之方法,其中PDE活性的测定系藉:测定细胞内环形GMP/环形AMP浓度比;其中于浓度为10M时此比値大于三倍时显示此化合物可进一步评估其是否可用于治疗赘瘤。7.根据申请专利范围第5项之方法,其中编程性细胞死亡之测定系藉:使化合物与细胞培养物接触;及测定化合物是否使胞浆内断裂的DNA增加;其中于浓度为100M时编程性细胞死亡的增加大于2折叠刺激时显示此化合物可进一步评估其是否可用于治疗赘瘤。8.一种选择是否可用于治疗赘瘤的化合物的方法,其包括测定化合物的生长抑制活性;测定化合物的PDE5抑制活性;选择展现生长抑制活性及PDE5抑制活性的化合物;及监定其生长抑制活性之IC50値为小于约100M的化合物在用于治疗赘瘤的可能性。9.根据申请专利范围第8项之方法,还包括测定化合物是否诱发细胞的编程性细胞死亡;及选择诱发编程性细胞死亡的化合物。10.根据申请专利范围第9项之方法,还包括选择编程性细胞死亡活性之EC50値小于约100M的化合物。11.根据申请专利范围第8项之方法,还包括测定化合物是否有COX抑制活性;及选择与PDE5抑制活性相比为低的COX抑制活性的化合物。12.根据申请专利范围第11项之方法,其中化合物COX抑制活性的测定系藉:使化合物与环加氧接触;及测定环加氧活性的改变,如果有改变的话;其中环加氧活性的降低与前列腺素合成活性减少有关。13.根据申请专利范围第11项之方法,其中化合物COX抑制活性的测定系藉:使化合物与分泌PGE-2的细胞接触;及测定细胞PGE-2分泌的减少,如果减少的话;其中PGE-2的分泌减少与前列腺素合成活性减少有关。14.一种监定可能用于给予需预防及长期治疗赘瘤的化合物的方法,其包括的步骤是:测定化合物的COX抑制活性;测定化合物的PDE5抑制活性;及监定那些于100M可抑制至少25%COX活性及i)于10M可抑制75%或更高之PDE5活性或ii)于20M可抑制50%或更高之PDE5活性之化合物为可用于治疗病人赘瘤的化合物。15.根据申请专利范围第14项之方法,其中测定化合物对抑制PDE5同功的选择性。16.根据申请专利范围第14项之方法,其还包括测定化合物的生长抑制活性;及监定磷酸二酯抑制活性实质上大于COX抑制活性的化合物在各种浓度展现生长抑制活性的化合物。17.根据申请专利范围第16项之方法,其中生长抑制活性系藉样品内的细胞数目减少测定。18.根据申请专利范围第14项之方法,其中生长抑制活性系藉诱发样品内编程性细胞死亡的量测定。19.根据申请专利范围第14项之方法,其中如果诱发的编程性细胞死亡量实质上较诱发的坏死量大,化合物还进一步监定治疗有需要治疗的病人的赘瘤的可能用途。20.一种筛检可用于治疗赘瘤的化合物的方法,其包括测定化合物的PDE5抑制活性及选择i)于10M可抑制75%或更高之PDE5活性或ii)于20M可抑制50%或更高PDE5活性的化合物。21.根据申请专利范围第20项之方法,还包括测定选出的化合物是否在细胞内诱发编程性细胞死亡及进一步选择诱发编程性细胞死亡活性大于预测値的化合物。22.根据申请专利范围第20项之方法,还包括测定选出的化合物是否抑制前列腺素合成及进一步选择抑制活性小于预测値的化合物。23.根据申请专利范围第20项之方法,其中PDE5活性是藉测量细胞内环形GMP及环形AMP测定,并测定环形GMP与环形AMP的比値是否增加。24.一种监定可能治疗赘瘤的化合物的方法,其包括:测定化合物的COX-I抑制活性;测定化合物的PDE5抑制活性;及监定那些于100M可抑制至少25%COX活性及i)于10M可抑制75%或更高之PDE5活性或ii)于20M可抑制50%或更高之PDE5活性之化合物为具有治疗赘瘤潜力之化合物。25.一种监定可能治疗赘瘤的化合物的方法,其包括:用要评估的化合物以约200M至200pM的浓度处理赘瘤细胞;测定处理过的细胞内的cGMP量;测定处理过的细胞内的cAMP量;其中处理过的细胞的cGMP/cAMP比値较未处理的赘瘤细胞内的cGMP/cAMP比値增加三倍时表示此化合物可用于治疗赘瘤;及将化合物与纯化的环加氧接触;及如果有变化的话,测量环加氧活性的变化;其中于100M浓度COX抑制活性少于25%时,表示此化合物应进一步评估其可能用于治疗赘瘤。26.根据申请专利范围第25项之方法,其中处理过的细胞内的cGMP量大于500飞母托莫耳/毫克蛋白质时表示此化合物可用于治疗赘瘤。27.根据申请专利范围第25项之方法,其中处理过的细胞内的cAMP量小于4000飞母托莫耳/毫克蛋白质时表示此化合物可用于治疗赘瘤。28.根据申请专利范围第27项之方法,其中处理过的细胞内的cAMP量小于4000飞母托莫耳/毫克蛋白质时表示此化合物可用于治疗赘瘤。29.一种选择可用于治疗赘瘤的化合物的方法,其包括比较此化合物之生长抑制活性与此化合物的PDE5抑制活性;及选择于100M可抑制生长及i)于10M可抑制75%或更高之PDE5活性或ii)于20M可抑制50%或更高PDE5活性的化合物。30.一种监定化合物可能用于治疗赘瘤之方法,其包括:以欲评估化合物处理赘瘤细胞;测定经处理细胞之细胞内cGMP的量;测定经处理细胞之细胞内cAMP的量;其中经处理细胞中cGMP/cAMP之比例较未处理细胞中之cGMP/cAMP之比例增加表示该化合物具有治疗赘瘤之可能性;及将化合物与纯化的环加氧接触;及如果有变化的话,测量环加氧活性的变化;其中于100M浓度COX抑制活性少于25%时,表示此化合物应进一步评估其可能用于治疗赘瘤。31.一种监定化合物有可能用于治疗赘瘤之方法,其包括:筛选具PDE5抑制活性之化合物;及评估该化合物之赘瘤细胞生长抑制活性,其中i)于10M可抑制75%或更高之PDE5活性或ii)于20M可抑制50%或更高PDE5活性及在100M抑制62%赘瘤细胞生长之化合物,其具有抑制赘瘤但实质上不抑制正常细胞生长之潜力。图式简单说明:图1说明苏灵大硫化合物衍生物及苏灵大衍生物(a.k.a.爱苏林)对纯化的环加氧活性的影响。图2说明试验化合物B及E对COX抑制的影响。图3说明苏灵大硫化物及爱苏林对由肿瘤细胞纯化出来的PDE-4及PDE5的抑制作用。图4说明苏灵大硫化物对HT-29细胞内环核酸含量的影响。图5说明化合物B的磷酸二酯抑制活性。图6说明化合物E的磷酸二酯抑制活性。图7说明苏灵大硫化物及爱苏林对HT-29细胞之编程性细胞死亡及坏死的影响。图8说明苏灵大硫化物及爱苏林对HT-29细胞生长抑制及诱发编程性细胞死亡之影响,此系以DNA断裂测定。图9说明化合物E之诱发编程性细胞死亡的性质。图10说明化合物B之诱发编程性细胞死亡的性质。图11说明苏灵大硫化物及爱苏林对肿瘤细胞生长的影响。图12说明苏灵大硫化物及对照(DMSO)之生长抑制及诱发编程性细胞死亡的活性。图13说明化合物E之生长抑制活性。图14说明苏灵大代谢物于鼠乳腺器官培养物内对前恶性瘤、赘瘤伤害之抑制。 |
