依赖因子之人类B细胞株之制法

摘要

本发明提供一种方法以建立依赖因子之人类B细胞系而可分泌所要专一性之免疫球蛋白且能长期培养。此方法包括选取静止B细胞而具有所要专一性之免疫球蛋白且在一种试剂而可交联其CD40表面抗原之存在下培养彼等细胞。长期培养需要持续存在交联剂。较佳方式系此种交联剂为单株抗体而对CD40抗原具专一性，并在可表现Fcγ－RⅡ之非复制哺乳类细胞之存在进行。

主权项

l﹒一种制造因子依赖性人类B细胞株之方法,此方法包括之步骤如下:单离出具有CD40抗原及具有所需专一性免疫球蛋白之人类静止B细胞;及于能交联CD40抗原之试剂存在下,培养人类静止B细胞;其中该交联剂系对于该CD40抗原具专一性之固定单株抗盐,且接至由非复制哺乳类动物细胞所表现之FcrRII受体上。2﹒根据申请专利范围第l项之方法,其中培养步骤进一步包括在白血球间素-4及/或干扰素-(,之存在下培养。3﹒根据申请专利范围第2项之方法,其中该单株抗体系选自Mab 89及G28-5,且其中该非复制鼠细胞系以pcD-hFcrR-16.2稳定转形之鼠L细胞。4﹒一种制造经依斯坦(Epstein)-巴(Barr)病毒转形之人类B细胞株之方法,此方法包括之步骤系在依斯坦-巴病毒及能交联CD40抗原之试剂之存在下培养人类B细胞﹔其中该交联剂系对于该CD40抗原具专一性之固定单株抗体,且接至由非复制哺乳类动物细胞所表现之FcrRII受体上。5﹒根据申请专利范围第4项之方法,其中该试剂系对该CD40抗原具专一性之固定单株抗体。6﹒根据申请专利范围第5项之方法,其中该固定单株抗体系接至由非复制哺孔类细胞表现之FdrRII受体上。7﹒根据申请专利范围第6项之方法,其中该单株抗体系选自Mab 89及G28-5,且其中该非复制鼠细胞系以pcD-hFcrR-16.2稳定转形之鼠L细胞。