一种大肠杆菌分泌表达外源蛋白的质粒载体及其构建方法

摘要

本发明公开了一种大肠杆菌分泌表达外源蛋白的质粒载体及其构建方法。具体地，本发明公开了一种重组分泌型表达载体，该载体含有碱性磷酸酶PhoA分泌信号肽及多聚组氨酸序列，能够在大肠杆菌BL21中经IPTG诱导表达外源重组蛋白。本发明还公开了上述表达载体的构建、PhoA引导肽‑外源蛋白融合基因克隆及融合蛋白表达与检测技术。该载体能使外源蛋白在胞外稳定表达，从而可应用于常规蛋白的分泌表达。

主权项

一种以PhoA信号肽引导表面免疫相关蛋白Sip蛋白分泌表达的大肠杆菌克隆表达质粒载体，所述表达质粒载体包含Lac操纵子‑PhoA引导肽‑TEV识别位点‑多克隆位点‑多聚组氨酸肽基因序列，所述表达质粒载体以质粒pET22b构建，所述质粒pET22b的序列为SEQ ID NO.3，所述表达质粒载体在序列SEQ ID NO.6的多克隆位点插入表面免疫相关蛋白Sip蛋白的基因序列，所述表达质粒载体具有SEQ ID NO.9的序列。