一种食物中四环素类含量的检测方法

摘要

本发明公开了一种食物中四环素类含量的检测方法，包括如下步骤：（1）25~150nM适配子探针与四环素类抗生素充分混合得到样品，将样品超声振荡提取，再用固相萃取小柱处理，10~40℃反应25~35min后，加入25~150nM DNA引物，并在37℃反应10~60min；加入100~300nM环状DNA模板，25~40℃反应0.5~2h，分别加入2~10U/μLPhi29 DNA聚合酶。本发明食物中四环素类含量的检测方法大大简化了检测步骤，降低了操作难度。

主权项

一种食物中四环素类含量的检测方法，其特征在于，包括如下步骤：（1）25~150nM适配子探针与四环素类抗生素充分混合得到样品，将样品超声振荡提取，再用固相萃取小柱处理，10~40℃反应25~35min后，加入25~150nM DNA引物，并在37℃反应10~60min；加入100~300nM环状DNA模板，25~40℃反应0.5~2h，分别加入2~10U/μLPhi29 DNA聚合酶，0.25~1mMdNTPs在25~40℃反应5h，水浴加热到60~70℃保温10~20min，终止反应；（2）20~200nM染料标记的DNA探针与2~20µg/mL石墨烯混合反应10~60min，4℃保存备用；（3）取步骤（1）滚环扩增产物与步骤（2）制备的20~200nM石墨烯基分子信标混合，体积比1:5~12，室温下测定体系中标记染料的荧光强度随时间变化曲线，测定体系中染料的荧光强度时间变化曲线，根据标准曲线外标法检测样品中四环素类抗生素的含量。