双链核酸的合成

摘要

本发明涉及用于从多种样品合成双链核酸的方法并且包括这些核酸用于深度序列分析的用途。另外，本发明涉及用于本发明方法的特定试剂。此外，本发明涉及包含用于本发明方法的试剂的试剂盒和所述试剂盒的用途。

主权项

用于从包含单链核酸的样品合成具有限定的3’和5’端核苷酸序列的双链核酸的方法，所述方法包括以下步骤：a)提供包含单链核酸或双链核酸的样品，任选地使所述双链核酸变性，b)向所述单链核酸或双链核酸的3’‑端添加至少5个连续的核苷酸，c)使与所添加核苷酸序列互补的引发寡核苷酸杂交并用模板依赖性DNA或RNA聚合酶合成cDNA或cRNA以产生双链核酸，d)使模板转换寡核苷酸与所述双链核酸杂交，以及e)使所述cDNA或cRNA链的3’末端延伸以合成双链核酸，其中所述核酸的一条链包含所述引发寡核苷酸以及与所述单链核酸和所述模板转换寡核苷酸互补的cDNA或cRNA。